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J-GLOBAL ID:201702286002003035   整理番号:17A1592533

ケルセチンによるイソラムネチンの生成のための組換え菌の構築とその変換条件の最適化について述べた。【JST・京大機械翻訳】

Optimization of transformation conditions and construction of recombinant bacteria for conversion quercetin to isorhamnetin
著者 (7件):
資料名:
巻:号:ページ: 50-57  発行年: 2017年 
JST資料番号: C3683A  ISSN: 2096-1359  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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イソラムネチンはフラボノイド類化合物であり、銀杏、沙棘、柳柳及び枸杞などの植物に広く存在し、多くの薬理作用を有する。植物由来のO-メチル化酵素はケルセチンのメチル化を行うことができるため、組換え菌の高効率発現のO-メチル化酵素を構築することで、ケルセチンを触媒することによりイソラムネチンを生成することができる。筆者らは,ダイズ由来のO-メチル化酵素SOMT-9のコード遺伝子をコドン最適化し,そのコドン適応指数(CAI)は最適化前の0.59から0.87に向上した。最適化された遺伝子SysOMT-9を発現ベクターpGEX-2Tに挿入し,組換えプラスミドpGEX-Sys-sOMTを構築した。組換えプラスミドを大腸菌BL21(DE3)に転換し、誘導温度及び誘導剤濃度を変化させることにより、SOMT-9の可溶性発現を実現した。これらの条件に基づいて,変換条件を最適化し,最適変換条件は以下の通りであった。最適条件は以下の通りであった:OD_(600)は10,温度は30°C,誘導剤のIPTGは0.01mmol/L,DMSOは1%,1%グリセロール,40μmol/LのS-アデノシルメチオニン,および1mmol/Lのケルセチンであった。これらの条件下で,組換え菌は12時間以内に,127mg/Lのケルセチンを生成し,133mg/Lのイソラムネチンを生成し,モル変換率は42%で,最適化前の7.8倍であった。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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酵素一般  ,  遺伝子発現 
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