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J-GLOBAL ID：201702286359428331   整理番号：17A1886039

dhbC遺伝子のクローニング,原核生物発現,および生物情報学的解析を用いて,ヒツジにおけるbhbC遺伝子のクローニングを行った。【JST・京大機械翻訳】

Cloning,Prokaryotic Expression and Bioinformation Analysis of dhbC Gene of Brucella melitensis

著者 (12件)： Li Baobao (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Nie Xin (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Yang Xiaojian (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Cao Ruiyong (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Zhu Shu (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Huang Haifeng (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Zhang Zhenxing (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Peng Dongmei (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Li Guohua (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Li Yaying (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Wang Fengyang (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228) ,  Du Li (海南大学熱帯農林学院,海南省熱帯動物繁育与疫病研究重点実験室,海口市動物基因工程重点実験室,海口570228)
資料名： Zhongguo Xumu Shouyi  (Zhongguo Xumu Shouyi)
巻： 44  号： 7  ページ： 1947-1953  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3580A  ISSN： 1671-7236  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究の目的は,ヒツジhbbC遺伝子のクローニングと原核生物発現を研究し,その発現蛋白質の生物情報学的分析を行うことである。GenBankにおけるブルセラ菌M5-90株のdhbC遺伝子配列情報に基づき、1対のプライマーを設計し、PCR反応によりdhbC遺伝子断片を増幅した。得られたdhbC遺伝子をpMD20-Tベクターに結合し、pMD20-T-dhbC組換えプラスミドを構築し、大腸菌(E.coli)DH5α感受細胞に転化し、プラスミドを抽出し、酵素消化を行った。組換えプラスミドpET28a-dhbCを構築し,E.coli BL21(DE3)細胞に形質転換した。発現産物をIPTGにより誘導し,発現産物をSDS-PAGEとWestern blottingにより分析した。生物情報学ソフトウェアDNAMAN及び関連オンラインWebサイトProtParam、SOPMA及びProtscaleを用いて、dhbC遺伝子のコード化したアミノ酸配列に対して生物情報学的分析を行った。その結果,dhbC遺伝子のサイズは約1093bpであり,発現蛋白質の発現は約47kuであったことが示された。その結果,dhbC蛋白質の分子量はC1866H2968N544O562S15であり,分子量は42496.3uで,理論的等電点(pI)は5.81,消光係数は33835,不安定係数は36.76であった。疎水性指数は86.19で,全平均疎水性(GRAVY)は-0.215であった。哺乳類の網状赤血球の半減期は30hであり、その二次構造はα-螺旋(41.94%)とランダムコイル(31.46%)を主とする。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 符号化 ,  二次構造 ,  形質転換 ,  哺乳類 ,  タンパク質 ,  ベクター ,  大腸菌 ,  *遺伝子 ,  アミノ酸配列 ,  PCR法 ,  分子量 ,  プラスミド ,  疎水性
準シソーラス用語： *バイオインフォマティクス ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： Brucella melitensis ,  dhbC gene ,  cloning ,  prokaryotic expression ,  bioinformatics analysis

分類 (2件)： 蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (6件)： 遺伝子 ,  クローニング ,  原核生物発現 ,  生物情報学 ,  解析 ,  ヒツジ