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J-GLOBAL ID:201702286521901501   整理番号:17A0450270

暮らしの中の過酸化水素レベルの多色イメージングと単一蛍光プローブによるアポトーシス細胞【Powered by NICT】

Multicolor imaging of hydrogen peroxide level in living and apoptotic cells by a single fluorescent probe
著者 (7件):
資料名:
巻: 91  ページ: 115-121  発行年: 2017年 
JST資料番号: D0173C  ISSN: 0956-5663  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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反応性酸素種(ROS)とアポトーシスの間のもつれの関係を理解するために,これらの二つの重要な生物学的事象の同時動的モニタリングのための緊急な必要性がある。本研究では,蛍光プローブ,pep4NP1,H_2O_2とカスパーゼ3,ROSのそれぞれのマーカーとアポトーシスを同時に検出できるを開発した。プローブはH_2O_2蛍光レポーター(NP1)とカスパーゼ3特異的認識ペプチドで連結されたCy5蛍光発色団を含んでいる。検出戦略は,pep4NP1のNP1とCy5との間の制御可能な蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)プロセスを介して実現し,H_2O_2との反応,分子計算とin vitroスペクトル研究で検証したようにした。カスパーゼ3の欠損では,H_2O_2の蓄積はFRETの存在により生細胞における663nmを中心としたpep4NP1の赤色蛍光を誘導した。対照的に,FRETは過剰発現したカスパーゼ3によるpep4NP1のペプチドスペーサの開裂によりアポトーシス細胞で阻害される。結果として,アポトーシス細胞におけるH_2O_2の産生を標識とき緑色蛍光(555nm)が優勢であった。Pep4NP1は,それぞれの反応部位に及ぼすH_2O_2とカスパーゼ3に対して優れた選択性を示した。pep4NP1は異なる蛍光波長を持つ生細胞とアポトーシス細胞の内在的に産生されたH_2O_2を区別し,ROS産生経路に関する追加情報を提供する。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (3件):
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バイオアッセイ  ,  蛋白質・ペプチド一般  ,  生化学的分析法 
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