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J-GLOBAL ID：201702287919479288   整理番号：17A0290214

複合戦略を介した枯草菌WB600による枯草菌168由来のL-アスパラギナーゼの増強した細胞外産生

Enhanced extracellular production of L-asparaginase from Bacillus subtilis 168 by B. subtilis WB600 through a combined strategy

著者 (7件)： FENG Yue (Jiangnan Univ., Wuxi, CHN) ,  LIU Song (Jiangnan Univ., Wuxi, CHN) ,  JIAO Yun (Jiangnan Univ., Wuxi, CHN) ,  GAO Hui (Jiangnan Univ., Wuxi, CHN) ,  WANG Miao (Jiangnan Univ., Wuxi, CHN) ,  DU Guocheng (Jiangnan Univ., Wuxi, CHN) ,  CHEN Jian (Jiangnan Univ., Wuxi, CHN)
資料名： Applied Microbiology and Biotechnology  (Applied Microbiology and Biotechnology)
巻： 101  号： 4  ページ： 1509-1520  発行年： 2017年02月 
JST資料番号： H0764A  ISSN： 0175-7598  CODEN： EJABDD  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： ドイツ (DEU)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 枯草菌168株由来のL-アスパラギナーゼ(ASN)を枯草菌WB600株で発現させ,組換株によるASNの細胞外産生を上昇させるためにシグナルペプチドスクリーニング,プロモーター変異とN末端除去を含む組換え戦略を実施した。8個のシグナルペプチド(ywbN,yvgO,amyE,oppA,vpr,lipAとwapA)をASNのN末端と融合させ,HpaIIプロモータを用いて枯草菌WB600で発現させた。シグナルペプチドwapAが最も高い細胞外ASN活性(28.91U/mL)を,またyvgOが最も低い細胞外活性(0.91U/mL)を示した。HpaIIプロモーターを強いP43プロモーターと置換した結果,ASN活性は38%上昇した。変異性PCR法により作製した5個のP43の変異体のうち,B2が最も高い細胞外ASN活性を示した。また,ASNのN末端の25個の残基の除去は,ASN活性を102.41U/mLまで上昇させた。3Lのバイオリアクタで流加培養法により増殖させた枯草菌/ASNΔ25/B2は407.6U/mLの細胞外ASN活性を達成した。精製したASNが最高活性を示す65°Cでの半減期は61分であった。

シソーラス用語： *枯草菌 ,  *アスパラギナーゼ ,  *菌体外蓄積 ,  生産性向上 ,  シグナルペプチド ,  アミノ酸配列 ,  アミノ酸残基 ,  欠失突然変異 ,  ヌクレオチド配列 ,  PCR法 ,  タンパク質合成 ,  分子遺伝現象 ,  プロモーター領域 ,  遺伝子欠損 ,  流加培養
準シソーラス用語： N-末端配列 ,  変異性PCR法 ,  組換蛋白質発現 ,  遺伝子欠失

分類 (3件)： 代謝と栄養  (EG03054K) ,  酵素一般  (EB09010D) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (4件)： 戦略 ,  枯草菌 ,  L-アスパラギナーゼ ,  増強