抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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単一細胞トランスクリプトミクスは新しいセルのタイプと機能だけでなく,ヒト疾患の病因と治療の分子的特徴,癌を含むをプローブする手段を同定するための強力な発見ツールを提供する。しかし,このような分析は,生物学的試料中の単一細胞からのmRNA単離の困難により制限されている。著者らは最近,単一生細胞からmRNAを単離するための光化学的方法を導入し,in vivo解析(TIVA)においてトランスクリプトーム。TIVAプローブは「ケージ」ポリUである:生きている組織に入るように設計されたpolyAオリゴヌクレオチドヘアピン,405nmレーザを用いた部位特異的活性化は標的細胞におけるmRNAに結合するポリUビオチン鎖を明らかにし,それに続くmRNA単離と配列決定を可能にした。TIVA法は,切除された組織における生細胞の分析に適しているが,全生物における生細胞に適用されていない。このより挑戦的な環境にTIVAの適用より高い熱安定性,よりロバストなケージング,ヌクレアーゼ耐性を持つプローブを必要とする。本論文では,強化された安定性の複数の側面を有する元のTIVAプローブに対する修正を提示した。これらの新しいプローブは高い熱安定性前光分解と改善されたmRNA捕獲親和性ポスト光分解のための二九mer polyAブロッキング鎖(”22/9/9”)を持つ拡張22merポリU捕獲鎖を利用した。「22/9/9GC」プローブは前光分解相互作用を半減以上mRNAに末端GC対を特徴としている。「PS22/9/9」プローブはホスホロチオ酸化骨格,<1h少なくとも48時間の血清安定性を拡張したを特徴とし,培養ヒト線維芽細胞への取込を仲介する。Copyright 2017 Royal Society of Chemistry All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST【Powered by NICT】
