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J-GLOBAL ID：201702288567601248   整理番号：17A1135623

HUHタグを用いるシーケンス誘起による一段階の蛋白質-DNA共有結合

Sequence-Directed Covalent Protein-DNA Linkages in a Single Step Using HUH-Tags

著者 (3件)： LOVENDAHL Klaus N. (Univ. Minnesota, Minnesota, USA) ,  HAYWARD Amanda N. (Univ. Minnesota, Minnesota, USA) ,  GORDON Wendy R. (Univ. Minnesota, Minnesota, USA)
資料名： Journal of the American Chemical Society  (Journal of the American Chemical Society)
巻： 139  号： 20  ページ： 7030-7035  発行年： 2017年05月24日 
JST資料番号： C0254A  ISSN： 0002-7863  CODEN： JACSAT  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 金属配位性のヒスチジン(H)が疎水性残基(U)により分離された構造をもつHUH-エンドヌクレアーゼドメインをもつ一連の天然蛋白質についてマンガンイオン/EDTA共存下にssDNAのニッキングによりホスホチロシン共有結合付加物が生成することを確かめた。HUHタグとしてPCV2,DCV,FBNYVが有効であり,それぞれ固有のDNAシーケンス選択性を示した。DCV-MMP2(切断サイト)-Mmob-GFPシーケンスを含む組替蛋白質とCy3またはCy5蛍光標識ssDNAの反応生成物をSDS-PAGEにより調べた。単分子力顕微鏡を用いHUHタグ官能化ノッチ受容体により細胞表面の標識化およびシグナリングを行った。固定化細胞および生きている細胞の表面標識化の経時変化を観察した。生きている細胞内のHUH融合蛋白質の蛍光標識化を検討した。

シソーラス用語： *アミノ酸配列 ,  配列相同性 ,  タンパク質 ,  DNA【核酸】 ,  *共有結合 ,  *エンドヌクレアーゼ ,  マンガン化合物 ,  金属イオン ,  *一本鎖DNA ,  付加物 ,  選択性 ,  組換タンパク質 ,  *蛍光標識 ,  反応生成物 ,  標識法 ,  固定化細胞 ,  *生体試料染色 ,  アクチン ,  脂肪族アミン ,  脂肪族カルボン酸 ,  アミノカルボン酸 ,  ジアミン ,  アミノ酸 ,  窒素複素環化合物 ,  第一アミン
準シソーラス用語： *ssDNA ,  βアクチン ,  アミノ酸配列相同性 ,  シグナリング ,  ドメイン構造 ,  マンガンイオン ,  細胞内染色 ,  細胞表面 ,  単分子 ,  標識化

分類 (5件)： 分子構造  (EB03020Y) ,  核酸一般  (EB04010U) ,  酵素一般  (EB09010D) ,  生体の顕微鏡観察法  (EA03050C) ,  分子化合物  (CE02000C)

物質索引 (3件)： EDTA ,  ヒスチジン ,  ホスホチロシン

タイトルに関連する用語 (7件)： タグ ,  シーケンス ,  誘起 ,  段階 ,  蛋白質 ,  DNA ,  共有結合