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J-GLOBAL ID：201702290300149461   整理番号：17A0068269

マウスB7-1遺伝子RNAIレンチウイルスベクターの構築とそのサイレンシング効果の研究【JST・京大機械翻訳】

Construction of lentiviral vector specific for mouse B7-1 gene interference and study on silencing effects induced by lentivirus-mediated B7-1 RNAi

著者 (7件)： Kong Yong (Department of Immunology,Medical College,Soochow University) ,  Shen Lijun (蘇州大学生物医学研究院) ,  Wang Jing (Department of Immunology,Medical College,Soochow University) ,  Zhu Ying (Department of Immunology,Medical College,Soochow University) ,  Cai Lei (Department of Immunology,Medical College,Soochow University) ,  Qiu Yuhua (Department of Immunology,Medical College,Soochow University) ,  Huang Li (蘇州大学附属儿童医院呼吸科)
資料名： Zhongguo Mianyixue Zazhi  (Zhongguo Mianyixue Zazhi)
巻： 32  号： 9  ページ： 1327-1332  発行年： 2016年 
JST資料番号： C2268A  ISSN： 1000-484X  CODEN： ZMZAEE  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的;マウスB7-1遺伝子のRNAIを媒介するレンチウイルスベクターを構築し、L929細胞表面のB7-1分子発現に対するサイレンシング効果を研究した。方法;マウスのB7-1遺伝子コード領域から3つのRNA干渉標的配列を選択し、転録双ヘアピンRNAの前駆体DNAを作製し、レンチウイルスシャトルプラスミドにクローニングし、B7-1のRNAIレンチウイルスシャトルベクターを構築し、配列決定を行った。組換えプラスミドおよびヘルパープラスミドを293T細胞に同時形質移入し,レンチウイルスを超遠心分離により得た。293T細胞のGFP発現レベルを測定し、ウイルス力価を測定し、フローサイトメトリーにより感染効率及び細胞表面B7-1に対する干渉効率を測定した。マウスのB7-1遺伝子のRNAIレンチウイルスを安定的に感染させたL929細胞をウイルスによりスクリーニングし,フローサイトメトリーによりGFPとB7-1の発現を分析した。感染細胞と分離したマウス脾臓T細胞を混合培養し,B7-1安定細胞を刺激してT細胞増殖を刺激する能力を分析した。【結果】;マウスB7-1遺伝子のRNA干渉を構築する組換えレンチウイルスベクターを成功裏に構築した。価(3~5)×108TU/MLの濃縮組換えレンチウイルスが得られ,組換えレンチウイルスはL929細胞のGFP発現を効率的に感染させ,その表面のB7-1をサイレンシングした。レンチウイルスが安定して感染したL929細胞を選別し、この細胞表面のB7-1分子の発現は抑制され、T細胞の増殖を刺激する能力は著しく低下した(P<0.05)。結論;B7-1分子を効率的に感染させることができ,B7-1分子の発現を安定化し,B7-1/CD28シグナルによって誘発されたT細胞増殖を阻害した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： DNA【核酸】 ,  トランスフェクション ,  RNA干渉 ,  混合培養 ,  フローサイトメトリー ,  *ウイルス ,  *レンチウイルス ,  プラスミド ,  *遺伝子サイレンシング ,  脾臓 ,  細胞表面 ,  293T細胞 ,  L929細胞 ,  *レンチウイルスベクター ,  *CD80抗原 ,  遺伝 ,  *微生物 ,  *動物ウイルス

著者キーワード (5件)： B7-1 ,  RNAi ,  Lentivirus ,  Co-stimulatory signal ,  L929

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (7件)： マウス ,  遺伝子 ,  RNAi ,  レンチウイルスベクター ,  構築 ,  サイレンシング ,  研究