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J-GLOBAL ID:201702290423997278   整理番号:17A1628884

単一細胞における一酸化窒素シンターゼイソ型の異なる一酸化窒素生成のリアルタイム可視化【Powered by NICT】

Real-time visualization of distinct nitric oxide generation of nitric oxide synthase isoforms in single cells
著者 (9件):
資料名:
巻: 70  ページ: 59-67  発行年: 2017年 
JST資料番号: W0926A  ISSN: 1089-8603  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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eNOS,nNOSとiNOS,一酸化窒素シンターゼ(NOS)ファミリーのメンバーは良く特性化された酵素である。しかし,適切な直接NOセンサの欠如のために,異なる一酸化窒素シンターゼアイソザイムによる細胞性NO産生の速度論的特性についてはほとんど知られていない。ごく最近,著者らは,細胞NO生成と変動の実時間測定を可能にする,geNOps,新しいクラスの蛍光蛋白質に基づくNOプローブを開発した。nNOSへのこれらの遺伝的NOバイオセンサを適用したeNOS,HEK293細胞をiNOS発現により,nNOSとeNOSの同程度の活性化剤として同じCa~2+シグナル伝達を示すことを単一細胞におけるそれぞれNO動力学を特性化することができた。著者らのデータは,Ca~2+動員にnNOS由来NO信号は瞬時に発生し,厳密にCa~2+上昇に従う一方eNOSによる放出は徐々に起こり,持続しないことを示した。iNOSを発現する細胞における高NOレベルを検出するために,二種の蛍光蛋白質に基づく新しいレシオメトリックプローブを開発した。この新しいgeNOp変異体はiNOSを発現する細胞で高いNO濃度の測定を可能にした。さらに著者らは,このプローブを用いた単一細胞のレベルに対するiNOSによるNO産生のLアルギニン依存性を研究した。著者らの実験は,geNOps技術である速度論,三種類全ての一酸化窒素シンターゼアイソフォームからの信号派生細胞NOの振幅と基質依存の明らかな違いを検出するのに適していることを明らかにした。Copyright 2017 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (1件):
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酵素一般 

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