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J-GLOBAL ID:201702291483967240   整理番号:17A1791229

ニワトリのStra8遺伝子のmiRNAの予測と同定【JST・京大機械翻訳】

Prediction and validation of miRNA targeting chicken Stra8 gene
著者 (11件):
資料名:
巻: 29  号:ページ: 729-736  発行年: 2017年 
JST資料番号: C3051A  ISSN: 1004-1524  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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Stra8遺伝子の3’UTRをクローン化するために,Stra8遺伝子を標的とするマイクロRNA(miRNA)を発見し,ニワトリの精原幹細胞のcDNAをテンプレートとし,NCBIデータベースStra8のCDS配列に従ってプライマーを設計した。Stra8遺伝子の3’UTRを,3’RACE技術によってクローン化し,対応するルシフェラーゼ発現ベクターと突然変異ベクターを構築した。生物学的予測ソフトを用いて、標的Stra83 UTRのmiRNAに対して予測を行い、最も高いスコアのmiRNAを選択し、レンチウイルスベクターの構築を行った。pRL-TKを内部標準とし、それぞれmiRNAとStra8 3’UTRルシフェラーゼ発現ベクターと突然変異ベクターを共にDF-1細胞にトランスフェクションし、二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子システムを用いてmiRNAに対する活性測定を行った。結果は,Stra8遺伝子の3’UTRが,3’RACE技術によって成功裏にクローン化されたことを示した。Targetscan生物学的オンラインソフトウェアは,標的遺伝子のStra8遺伝子の4つの高い特異的miRNAを予測し,対応するレンチウイルスベクターを構築することに成功した。二重ルシフェラーゼアッセイにより,gga-miR-1a,gga-miR-31,gga-miR-218は,3’UTR配列によりStra8遺伝子の発現を抑制し,gga-miR-31の抑制効果が最も高いことを示した。これらの結果は,gga-miR-31によって仲介されたStra8遺伝子が,雄性生殖細胞の分化における調節ネットワークに関する更なる研究のための基礎を提供することができることを示した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (1件):
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遺伝子発現 
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