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J-GLOBAL ID:201802210449098721   整理番号:18A1440035

Fh8は,PCV2Cap蛋白質の可溶性発現と抗原性を有意に強化した。【JST・京大機械翻訳】

Fasciola hepatica 8 significantly enhances soluble expression of Cap from PCV2 and its immunogenicity
著者 (7件):
資料名:
巻: 34  号:ページ: 356-360  発行年: 2018年 
JST資料番号: C2703A  ISSN: 1000-4440  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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ブタサーコウイルス2型(Porcinecircovirustype2、PCV2)の主要機能タンパクCap蛋白は、体外で可溶性発現を得ることが困難である。本研究では、Fh8タンパク質を融合タグとして、PCV2ORF2遺伝子の大腸菌における可溶性発現を実現し、マウスを用いて可溶性Capタンパク質の抗原性を評価した。ウイルスゲノムをテンプレートとし、ORF2ターゲット遺伝子を増幅し、pCold原核発現プラスミドを挿入し、成功的に構築したpCold-ORF2陽性プラスミドを大腸菌BL21に導入した。Cap蛋白質の可溶性発現をSDS-PAGEによって分析し,Cap蛋白質の反応性をウェスタンブロット法によって同定した。組換え型タンパク質とアジュバントの乳化により免疫原を作製し、Balb/cマウスを免疫し、ELISA法により血清中のCap抗体を測定し、PCRにより組織臓器中のウイルス量を測定した。可溶性Cap蛋白質の免疫原性を評価した。PCR結果により、Fh8とPCV2ORF2遺伝子の増幅に成功した。SDS-PAGEの結果,Fh8タグは大腸菌におけるORF2の可溶性発現を著しく改善し,分子量は35000であった。ブタPCV2陽性血清は可溶性Cap蛋白を特異的に識別できる。マウスにCapタンパク質を28日間接種した後、抗体はすべて陽性となり、PCV2の攻撃に免れなかった。PCV2ORF2遺伝子の可溶性発現は新しい小ラベルにより実現され,良好な免疫原性を示した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
分類 (2件):
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分子遺伝学一般  ,  豚 
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