文献

J-GLOBAL ID：201802210998962212   整理番号：18A1135778

in vivo薬理学および代謝追跡研究のためのMortierella alpinaのミクロ培養からのU-13CおよびU-14Cアラキドン酸の単一管生合成および抽出【JST・京大機械翻訳】

Single-tube biosynthesis and extraction of U-¹³C and U-¹⁴C arachidonic acid from microcultures of Mortierella alpina for in vivo pharmacology and metabolic tracing studies

著者 (1件)： Qasem Rani J. (Department of Pharmacology, Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, Philadelphia, PA, 19104, USA)
資料名： Journal of Pharmacological and Toxicological Methods  (Journal of Pharmacological and Toxicological Methods)
巻： 92  ページ： 1-12  発行年： 2018年 
JST資料番号： A0132B  ISSN： 1056-8719  CODEN： JPTMEZ  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 重および放射性同位体標識は,in vivoでの生化学的または医薬品の薬理活性および代謝運命を追跡するために一般的に使用される方法である。近年,重炭素-13(U-13C)または放射性炭素-14(U-14C)同位体で均一に標識された分子に対する要求が増加している。多価不飽和脂肪酸(PUFAs)は,炭化水素骨格の均一な13Cまたは14C同位体濃縮が多数の技術的,代謝的および薬理学的利点を有する1つの古典的な例を代表する。PUFAは通常,真菌類または藻類で生産され,炭化水素鎖の均一な13Cまたは14C濃縮は,微生物を適切なU-13CまたはU-14C基質を供給することにより達成される。U-13CまたはU-14C脂肪酸の生合成を記述する以前の文献法は,予想されたものより少ない可変同位体濃縮を報告し,放射線毒性による微生物の不一致成長を受けた。本研究では,土壌菌類Mortierella alpinaの微小培養からの標準的なPUFAであるU-13CおよびU-14Cアラキドン酸(AA)の生合成および抽出のための単一チューブ法について述べた。U-13C-AAを生産するために,真菌胞子と菌糸断片の懸濁液を直接接種し,それぞれの炭素と窒素源としてU-13C-グルコースとNaNO_3から成る培地で深部培養に成長させた。AAの全13C濃縮は95%以上であり,U-13C-AAの割合は60~70%の範囲であった。これらの値は以前に報告された方法によるものではなかった。U-14C-AAを生産するために,この手順を改良して,菌類増殖に及ぼす14Cの放射線毒性効果を制限した。浸漬培養は最初に通常の12C-グルコースで増殖した。次に,グルコース枯渇後,バイオマスを収集し,U-14C-グルコース上で直ちに培養した。このアプローチは報告された文献では前例がなく,微生物に対する14Cの放射線毒性効果を有意に制限している。12Cから14C基質へのバイオマス移動は,脂肪酸合成モードで微生物を維持するために必要な炭素の非中断供給を維持し,14C生成物の同位体純度を高めるために必要な代謝状態であるβ-酸化を抑制するために時間を要した。14C濃縮AAの比活性は,864Ci/mol(708~1020Ci/molの範囲)で推定され,AA炭化水素骨格に沿った69.2%(56.7~81.7%の範囲)14C濃縮を示唆した。本法は,微生物培養と脂質抽出のための単一管を用いて,標識生成物の操作損失と酸化分解を最小化した。生産コストは比較的安価で,U-13CとU-14C-AAの収率は文献法に匹敵し,in vitroとin vivo薬理学的研究に十分である。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 接種 ,  酸化 ,  バイオマス ,  懸濁液 ,  in vitro実験 ,  純度 ,  *生合成 ,  毒性 ,  *培養 ,  *Mortierella ,  炭化水素 ,  炭素 ,  同位体 ,  ヘキソース ,  アルドース
準シソーラス用語： *Mortierella alpina , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： 安定同位体標識 ,  RI標識 ,  代謝トレーサ ,  多不飽和脂肪酸 ,  アラキドン酸 ,  Mortierella alpina

分類 (2件)： 生物薬剤学(基礎)  (GY01021U) ,  薬物の研究法  (GV01020U)

物質索引 (1件)： グルコース

タイトルに関連する用語 (7件)： 薬理学 ,  代謝 ,  追跡 ,  研究 ,  Mortierella ,  アラキドン酸 ,  生合成