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J-GLOBAL ID：201802220639503028   整理番号：18A0158686

機能性蛋白質のアプタマー促進精製【Powered by NICT】

Aptamer facilitated purification of functional proteins

著者 (6件)： Beloborodov Stanislav S. (Department of Chemistry and Centre for Research on Biomolecular Interactions, York University, Toronto, Ontario M3J 1P3, Canada) ,  Bao Jiayin (Department of Chemistry and Centre for Research on Biomolecular Interactions, York University, Toronto, Ontario M3J 1P3, Canada) ,  Krylova Svetlana M. (Department of Chemistry and Centre for Research on Biomolecular Interactions, York University, Toronto, Ontario M3J 1P3, Canada) ,  Shala-Lawrence Agnesa (Department of Chemistry and Centre for Research on Biomolecular Interactions, York University, Toronto, Ontario M3J 1P3, Canada) ,  Johnson Philip E. (Department of Chemistry and Centre for Research on Biomolecular Interactions, York University, Toronto, Ontario M3J 1P3, Canada) ,  Krylov Sergey N. (Department of Chemistry and Centre for Research on Biomolecular Interactions, York University, Toronto, Ontario M3J 1P3, Canada)
資料名： Journal of Chromatography B  (Journal of Chromatography B)
巻： 1073  ページ： 201-206  発行年： 2018年 
JST資料番号： W0571A  ISSN： 1570-0232  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 抗体とは対照的に,それらは化学的に合成できるので,DNAアプタマーは親和性クロマトグラフィーのための魅力的な捕捉プローブであり,タグ特異的捕捉プローブ(ニッケルNTAまたはグルタチオンのような)とは対照的に,それらは遺伝的修飾(His又はGSTタグなど)の遊離蛋白質の精製に用いることができる。捕捉プローブとしてアプタマーのこれらの魅力的な特性にもかかわらず,アプタマーベース蛋白質精製に関する二,三の報告が存在するが,それらのどれも精製蛋白質の活性の試験を含む,それらの活性状態の蛋白質を精製する方法の能力に関する抑制疑問脱離しなかった。本研究の目的は,アプタマーは活性蛋白質の分離を促進することを証明した。完全なアプタマーに基づく親和性精製法,4時間完全にを精密化した。細菌細胞培養から,MutSとAlkB,二種類の組換蛋白質を精製するためにこの方法を適用した:培養の0.5mLの培養の4mLと82%純MutSの0.24mgから85%純AlkBの0.21mg。最後に,二種類のキャピラリー電気泳動に基づく分析による蛋白質活性AlkB酵素アッセイおよびMutSのDNA結合アッセイを証明した。粗細胞溶解物の非精製蛋白質標的に対するアプタマー選択と組み合わせたアプタマーに基づく精製は抗体を使わずに彼らの天然状態内でタグなし組換え型蛋白質の迅速単離する手段を提供することを示唆した。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： 単離 ,  脱着 ,  培養 ,  捕獲 ,  抗体 ,  *タンパク質 ,  プローブ ,  DNA【核酸】 ,  組換タンパク質 ,  親和性 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  キャピラリー電気泳動 ,  脂肪族アミン ,  チオール ,  脂肪族カルボン酸 ,  トリペプチド ,  含硫アミノ酸
準シソーラス用語： 細胞溶解 ,  *アプタマー , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： アプタマー促進蛋白質精製 ,  蛋白質活性 ,  AlkB ,  MutS ,  脱メチル化分析 ,  ミスマッチ結合分析

分類 (2件)： 蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N) ,  生化学的分析法  (EA03030G)

物質索引 (1件)： グルタチオン

タイトルに関連する用語 (4件)： 機能性蛋白質 ,  アプタマー ,  促進 ,  精製