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J-GLOBAL ID：201802221779119134   整理番号：18A0788073

K. palustris IPUFS-1由来の潜在的pKPAL3プラスミドを用いた新規大腸菌-Kocuriaシャトルベクターの開発とエナンチオ純粋な(S)-スチレンオキシドの生産におけるその利用【JST・京大機械翻訳】

Development of a Novel Escherichia coli-Kocuria Shuttle Vector Using the Cryptic pKPAL3 Plasmid from K. palustris IPUFS-1 and Its Utilization in Producing Enantiopure (S)-Styrene Oxide

著者 (2件)： Toda Hiroshi (Department of Biotechnology, Biotechnology Research Center, Toyama Prefectural University) ,  Itoh Nobuya (Department of Biotechnology, Biotechnology Research Center, Toyama Prefectural University)
資料名： Frontiers in Microbiology (Web)  (Frontiers in Microbiology (Web))
巻： 8  ページ： 2313  発行年： 2017年 
JST資料番号： U7080A  ISSN： 1664-302X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 新しい潜在的pKPAL3プラスミドをグラム陽性微生物Kocuria palustris IPUFS-1から分離し,詳細に特性化した。pKPAL3は長さ4443bpの円形プラスミドである。オープンリーディングフレーム(ORF)と相同性検索分析は,pKPAL3が4つのORFを有することを示した。しかし,プラスミドで予測された複製蛋白質コード遺伝子はなかった。代わりに,K.rhizophila DC2201(NBRC103217)ゲノム配列の非翻訳領域と有意な同一性を示す2つのヌクレオチド配列領域があり,これらの配列はKocuria細胞におけるpKPAL3の自律的複製に必須であった。これらの知見に基づいて,pKPAL3から新規大腸菌-KocuriaシャトルベクターpKITE301(カナマイシン耐性)とpKITE303(チオストレプトン耐性)を構築した。構築されたシャトルベクターのコピー数は細胞当たり20と推定され,それらは抗生物質の不在下でKocuria形質転換細胞において低い分離安定性を示した。さらに,構築したベクターは他のK.rhizophilaシャトルベクターpKITE103との適合性を示した。著者らは,グリセルアルデヒド3-リン酸デヒドロゲナーゼ(gapdh)プロモーターの制御下で,pKITE301PとpKITE103Pベクターを用いて,K.rhizophila DC2201において,Rhodococcus sp. ST-10(rhsmo)からのスチレンモノオキシゲナーゼ遺伝子とLeifsonia sp. S749(lsadh)からのアルコールデヒドロゲナーゼ遺伝子を含む複数の異種遺伝子を成功裏に発現させた。RhSMO-LSADH共発現K.rhizophilaを有機溶媒-水二相反応系におけるバイオ触媒として用いて,水素供与体として2-プロパノールの存在下で99%eeでスチレンを(S)-スチレンオキシドに効率的に変換した。有機溶媒中での反応の生成物濃度は,最適条件下で30時間後に235mMに達した。このように,この新規シャトルベクターは有機溶媒耐性Kocuria細胞に基づくバイオ触媒の開発に有用であることを示した。Copyright 2018 The Author(s). All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 有機溶媒 ,  *シャトルベクター ,  アルコールデヒドロゲナーゼ ,  コピー数 ,  抗生物質 ,  キャラクタリゼーション ,  ヌクレオチド配列 ,  デヒドロゲナーゼ ,  *プラスミド ,  プロモーター領域 ,  バイオ触媒 ,  *大腸菌 ,  ロドコッカス属 ,  *コクリア属 ,  抗細菌薬 ,  抗微生物薬 ,  薬物 ,  *微生物 ,  放線菌目 ,  芳香族炭化水素 ,  ビニル化合物
準シソーラス用語： Rhodococcus ,  *Kocuria , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： Kocuria rhizophila ,  Kocuria palustris ,  スチレンモノオキシゲナーゼ ,  スチレンオキシド ,  二相系反応系 ,  有機溶媒耐性バイオ触媒

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

物質索引 (1件)： スチレン

タイトルに関連する用語 (6件)： プラスミド ,  大腸菌 ,  Kocuria ,  シャトルベクター ,  開発 ,  スチレンオキシド