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J-GLOBAL ID：201802222379412171   整理番号：18A0643374

カルシウム感受性受容体によって仲介されるヒト臍帯静脈内皮細胞におけるカルシウム内流および一酸化窒素生成過程におけるTRPC1とSTIM1の相互作用【JST・京大機械翻訳】

Interaction between TRPC1 and STIM1 in calcium sensing receptor mediated calcium influx and nitric oxide production in human umbilical vein endothelial cells

著者 (6件)： Wang Lamei (832002,石河子大学医学院新疆地方病与民族高発病教育部重点実験室病理生理教研室病理教研室) ,  Zhong Hua (832002,石河子大学医学院新疆地方病与民族高発病教育部重点実験室病理生理教研室病理教研室) ,  Tang Na (832002,石河子大学医学院新疆地方病与民族高発病教育部重点実験室病理生理教研室病理教研室) ,  Pang Lijuan (832002,石河子大学医学院新疆地方病与民族高発病教育部重点実験室病理生理教研室病理教研室) ,  Zhang Chunjun (832002,石河子大学医学院新疆地方病与民族高発病教育部重点実験室病理生理教研室病理教研室) ,  He Fang (832002,石河子大学医学院新疆地方病与民族高発病教育部重点実験室病理生理教研室病理教研室)
資料名： Zhonghua Xinxueguanbing Zazhi  (Zhonghua Xinxueguanbing Zazhi)
巻： 45  号： 11  ページ： 978-984  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2313A  ISSN： 0253-3758  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】カルシウム感受性受容体(CaR)によって仲介されるヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)におけるカルシウムイオン(Ca2+)と一酸化窒素(NO)の間の相互作用について,古典的な一過性受容体電位チャネル1(TRPC1)の相互作用を調査する。方法:華中科学技術大学の同済医学院付属同済病院の産婦人科健康妊娠出産婦の帝王切開新生児の新鮮な臍帯を取り、初代培養し、継代培養を行った。得られたHUVECをCaRアゴニスト[Ca(2+)],受容体操作性カルシウムチャンネル(ROC),ROC模倣剤12-O-テトラデカン-13-酢酸エステル(TPA)+CaR負性アロステリック調節剤(31-8220),古典的PKCsとPKCμ阻害剤Go6967(活性化SOC,遮断)によって共培養した。TRPC1とSTIM1の蛋白質発現を,免疫蛍光法によって検出し,TRPC1とSTIM1の間の相互作用を,免疫共沈降法によって検出した,そして,それらの間の相互作用を,免疫共沈降法によって検出した。2~3世代のHUVECをグループ分けした。構築したTRPC1,STIM1干渉プラスミド(shTRPC1,shSTIM1)を,shTRPC1+shSTIM1群(実験群),vehicle-shTRPC1+vehicle-shSTIM1群(空プラスミド群)と対照群に分けた。3つの細胞を,上記の4つの異なる薬物によって,それぞれ介入されることによって,介入されることができた。蛍光プローブFura-2/AMを用いて、HUVEC細胞内のカルシウムイオン濃度([Ca2+]i)の変化を測定し、NO蛍光プローブDAF-FM負荷法により、HUVEC中のNO生成の変化を同期的に測定した。【結果】(1)TRPC1とSTIM1の蛋白質発現は,HUVECにおいて有意に増加した(P<0.01)。レーザー共焦点顕微鏡下では,正常対照群におけるTRPC1とSTIM1蛋白質の発現が陽性であることが示された。細胞質は,Calhex231+TPA+スペルミン+Ca2+群,Ro31-8220+スペルミン+Ca2+群,Go6976+スペルミン+Ca2+群において,細胞質中に局在したTRPC1とSTIM1によって減少した。両者の結合も減少した。(2)HUVECにおけるTRPC1とSTIM1の間の相互作用は,以下の通りであった。Calhex231+ TPA+スペルミン+Ca2+群,Rol31+8220+スペルミン+Ca2+群,Go6976+スペルミン+Ca2+群のSTIM1/TRPC1とTRPC1/STIM1の相対比率は,それぞれ(25.98±2.17)%と(44.10±4.01)%,(23.88±2.05)%,および(39.65±2.91)%であった(それぞれ,P<0.01),P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。それらは,対照群(100.00±4.66)%と(100.00±6.40)%,およびスペルミン+Ca2+群の(106.04±2.45)%と(107.78±2.66)%より有意に低かった(P<0.05)。(3)4つの異なる薬物によって誘発されたHUVECにおける[Ca2+]iとNOの産生に及ぼすTRPC1とSTIM1の影響を研究した。4つの異なる薬物によって誘発されたHUVECにおける[Ca2+]iの蛍光強度比の変化(△ratio)とNOの正味蛍光強度の間の相関は,TRPC1とSTIM1の組合せによって,同じ傾向を示した。実験群の[Ca2+]iΔratio値とNO純蛍光強度の値はいずれも対照群と空プラスミド群より明らかに低く(P<0.05),空プラスミド群と対照群の間に有意差はなかった(P>0.05)。結論 TRPC1とSTIM1は二元複合体の形式でCaR媒介HUVEC Ca2+内流とNO生成を共同で調節する。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *一酸化窒素 ,  蛍光抗体法 ,  *相互作用 ,  複合体 ,  プラスミド ,  細胞質 ,  共培養 ,  初代培養 ,  カルシウムチャンネル ,  *受容体 ,  新生児
準シソーラス用語： 蛋白質発現 ,  カルシウムイオン ,  *STIM1蛋白質 ,  *TRPC1 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (7件)： Endothelial cells ,  Umbilical veins ,  Intracellular calcium-sensing proteins ,  Receptors ,  calcium-sensing ,  Calcium ,  Nitric oxide

分類 (2件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  細胞・組織培養法  (EA03040R)

タイトルに関連する用語 (9件)： カルシウム感受性受容体 ,  仲介 ,  ヒト臍帯静脈内皮細胞 ,  カルシウム ,  一酸化窒素 ,  過程 ,  TRPC1 ,  STIM1 ,  相互作用