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J-GLOBAL ID：201802224447764366   整理番号：18A0711892

Bacillus anthracisにおける標的遺伝子置換のためのGolden Gate法とI-SceIエンドヌクレアーゼを用いた高効率クローニングシステムの構築【JST・京大機械翻訳】

Construction of a high-efficiency cloning system using the Golden Gate method and I-SceI endonuclease for targeted gene replacement in Bacillus anthracis

著者 (9件)： Wang Tiantian (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China) ,  Wang Dongshu (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China) ,  Lyu Yufei (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China) ,  Feng Erling (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China) ,  Zhu Li (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China) ,  Liu Chunjie (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China) ,  Wang Yanchun (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China) ,  Liu Xiankai (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China) ,  Wang Hengliang (State Key Laboratory of Pathogens and Biosecurity, Beijing Institute of Biotechnology, 20 Dongdajie Street, Fengtai District, Beijng 100071, China)
資料名： Journal of Biotechnology  (Journal of Biotechnology)
巻： 271  ページ： 8-16  発行年： 2018年 
JST資料番号： A0456C  ISSN： 0168-1656  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Bacillus anthracisにおける遺伝子機能を調べるために,高効率クローニングシステムは対立遺伝子交換の増加率を必要とする。金のGateクローニングは,同じ反応系においてタイプII型制限酵素とT4 DNAリガーゼを用いて標的プラスミドを構築するために,複数のDNAフラグメントを同時に,一方向に集合させることを可能にする分子クローニング戦略である。ここでは,B.anthracis S-層蛋白質EA1対立遺伝子交換ベクターをGolden Gate法を用いて構築することに成功した。このノックアウトベクターに新しい制限部位は導入されず,DNA断片のシームレス集合が達成された。対立遺伝子交換ベクターと染色体DNAの間の相同組換えの効率を上げるために,対立遺伝子交換ベクターにI-SceI部位を導入した。このベクターを用いて,B.anthracisにおいてeag遺伝子を成功裏にノックアウトした。同時に,対立遺伝子交換ベクター構築法を,B.anthracis対立遺伝子交換ベクターを生成するためのシステムに開発した。このシステムの有効性を検証するために,いくつかの他の対立遺伝子交換ベクターを構築し,遺伝子置換をB.anthracisで行った。この遺伝子ノックアウトベクター構築システムとI-SceIエンドヌクレアーゼを用いた高効率標的遺伝子置換が他のBacillus spp.に適用できると推測した。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： プラスミド ,  遺伝子クローニング ,  *遺伝子 ,  金 ,  DNA【核酸】 ,  タンパク質 ,  *炭疽菌 ,  対立遺伝子 ,  ベクター ,  相同組換 ,  *エンドヌクレアーゼ ,  染色体
準シソーラス用語： 遺伝子組換 ,  *クローニング ,  *遺伝子置換 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： 炭そ菌 ,  ゴールデンゲート ,  対立遺伝子交換 ,  i-Scei

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (8件)： Bacillus ,  標的遺伝子 ,  置換 ,  I-SceI ,  エンドヌクレアーゼ ,  高効率 ,  クローニング ,  構築