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J-GLOBAL ID:201802224948034116   整理番号:18A0654819

3.0T核磁気共鳴は,ラットにおけるシクロオキシゲナーゼ-2遺伝子サイレンシングの幹細胞を追跡する。【JST・京大機械翻訳】

In vivo tracking human bone marrow-derived mesenchymal stem cells after genetically modified
著者 (8件):
資料名:
巻: 34  号: 11  ページ: 1871-1874  発行年: 2017年 
JST資料番号: C2337A  ISSN: 1001-9030  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】Molday IONRhodamine-BTM(MIRB)によって媒介されるレンチウイルスによるシクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)遺伝子サイレンシングによって,ヒト骨髄間葉系幹細胞(hBMSCs)におけるラットの生体内追跡を研究することを目的とした。【方法】hBMCSsにおけるCOX-2遺伝子のサイレンシングによって,遺伝子発現を逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)とウエスタンブロットによって検出した。新しい酸化鉄粒子(MIRB)により標識したhBMSCsを最適化し,細胞増殖能を細胞計数キット(CCK-8)により測定し,細胞の骨形成能と脂質生成能を細胞計数キットにより測定した。MIRB標識,レンチウイルス媒介COX-2遺伝子サイレンシングのhBMSCs,単純hBMSCsとリン酸緩衝液(PBS)を3群に分け,それぞれ尾静脈注射によりヒトの体内に注射した。注射後1時間、7日、14日に、臨床3.0T MRIによりラット脳、肝臓を測定し、検出後にラットを屠殺し、脳、肝臓組織パラフィン切片を採取し、蛍光顕微鏡で組織内蛍光を観察し、プルシアンブルー染色で組織内の鉄粒子位置を観察した。結果:RT-PCRとWestern blotにより、COX-2がhBMSCsにおいて成功にノックアウトされ、対照群と比較して、MIRB濃度が10μg Fe/mlの時、標識率は90%に達したことが証明された。濃度が20μg Fe/mlに上昇した時に,標識率は98%に達し,50μg Fe/mlの濃度では,20μg Fe/mlの場合と比較して有意差はなかった(P>0.05)。MIRB濃度<50μg Fe/mlの時に、遺伝子組換え幹細胞に対して成功的に標識することは、その分化、増殖能力に影響を与えない。ラットの体内注射7日後、MRI勾配エコーT2加重によりラット肝臓組織内に低信号逃避領域が発見され、時間延長に伴い徐々に増強し、注射14日後に低信号領域が安定になった。組織切片により、ラットの肝臓血管、血洞、肝臓小葉間と被膜中に鉄粒子の存在を発見した。結論:MIRBは遺伝子組み換え幹細胞に対して生物学的安全性、効率的な標識、多重方法検査の利点があり、MIRBで標識されたレンチウイルスがCOX-2遺伝子サイレンシングを誘導するhBMSCsは注射14日以内、3.0T MRIで検出でき、追跡することができる。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
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JSTが定めた文献の分類名称とコードです
細胞生理一般  ,  細胞・組織培養法  ,  代謝異常・栄養性疾患一般 

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