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J-GLOBAL ID:201802226326150755   整理番号:18A0688261

siRNAによるHepG-2細胞におけるB7-H3のサイレンシングによる細胞挙動への影響に関する研究【JST・京大機械翻訳】

Influence of B7-H3-siRNA on HepG-2 cellular behavior
著者 (7件):
資料名:
巻: 25  号: 21  ページ: 3379-3383  発行年: 2017年 
JST資料番号: C3555A  ISSN: 1672-4992  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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目的;HepG2細胞におけるB7-H3遺伝子発現のサイレンシングによる細胞周期、増殖及び移動能力への影響を検討する。方法;B7-H3遺伝子に対するsiRNAと干渉のないsiRNA配列を設計し、それぞれ干渉ベクターpSilencer4.1-CMV neo/B7-H3と無関係な干渉ベクターpSilencer4.1-CMV neo/NCを構築した。HepG2細胞をリポフェクタミン2000によって染色し,G418によってスクリーニングした後に,対応する細胞モデルを得るためにG418を用いた。RT-PCRとウェスタンブロット法を用いて,ブランク対照群(WT),非干渉群(si-NC),およびB7-H3干渉群(si-B7-H3)の細胞におけるB7-H3mRNAと蛋白質発現を検出した。細胞増殖は,CCK-8細胞増殖試験とクローン形成試験によって評価した。各群の細胞周期分布を,フローサイトメトリーによって検出し,ヨウ化プロピジウム(PI)染色によって検出した。各群の細胞移動能力を,細胞スクラッチ試験によって検出した。結果;pSilencer4.1-CMV neo/B7-H3干渉ベクターを成功裏に構築し、RT-PCR及びWestern blotの結果により、B7-H3干渉群は空白対照群、無関係な干渉群のmRNA及び蛋白レベルが明らかに低下したことが示された。CCK-8の増殖、クローン形成実験、細胞スクラッチ実験及びフローサイトメトリーの結果、B7-H3干渉群の増殖は明らかに抑制され、クローンは小さく、クローン数は減少し、細胞周期はG0/G1期に停止し、細胞移動能力は抑制された。結論;siRNAターゲッティング干渉B7-H3発現はHepG-2細胞の増殖を抑制し、細胞周期停止を誘導し、細胞遊走能力を低下させ、実験結果はB7-H3ターゲットに対する肝癌免疫治療の開発に予備実験と理論的基礎を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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細胞生理一般 
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