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J-GLOBAL ID：201802230872303051   整理番号：18A0786303

細菌におけるスーパーオキシドの生産はストレスおよび細胞状態依存性である:蛍光染料によるROS測定アーチファクトを最小化するゲート最適化フローサイトメトリー法【JST・京大機械翻訳】

Production of Superoxide in Bacteria Is Stress- and Cell State-Dependent: A Gating-Optimized Flow Cytometry Method that Minimizes ROS Measurement Artifacts with Fluorescent Dyes

著者 (9件)： McBee Megan E. (Infectious Disease Interdisciplinary Research Group, Singapore-MIT Alliance for Research and Technology) ,  Chionh Yok H. (Infectious Disease Interdisciplinary Research Group, Singapore-MIT Alliance for Research and Technology) ,  Chionh Yok H. (Department of Microbiology and Immunology, Yong Loo Lin School of Medicine, National University of Singapore) ,  Sharaf Mariam L. (Infectious Disease Interdisciplinary Research Group, Singapore-MIT Alliance for Research and Technology) ,  Ho Peiying (Infectious Disease Interdisciplinary Research Group, Singapore-MIT Alliance for Research and Technology) ,  Cai Maggie W. L. (Infectious Disease Interdisciplinary Research Group, Singapore-MIT Alliance for Research and Technology) ,  Cai Maggie W. L. (Department of Microbiology and Immunology, Yong Loo Lin School of Medicine, National University of Singapore) ,  Dedon Peter C. (Infectious Disease Interdisciplinary Research Group, Singapore-MIT Alliance for Research and Technology) ,  Dedon Peter C. (Department of Biological Engineering, Massachusetts Institute of Technology, Cambridge)
資料名： Frontiers in Microbiology (Web)  (Frontiers in Microbiology (Web))
巻： 8  ページ： 459  発行年： 2017年 
JST資料番号： U7080A  ISSN： 1664-302X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 微生物代謝とストレス応答における活性酸素種(ROS)の役割は,微生物学と感染症における主要なテーマとして出現した。反応性蛍光染料は,複雑な細胞内環境,特に高含量及び高スループット分析においてROSの研究を進歩させる可能性がある。しかしながら,細胞内ROSを測定する現在の染料ベースのアプローチは,有意なアーチファクトの可能性を有している。ここでは,蛍光色素を用いた細菌におけるROSのフローサイトメトリー定量化のためのロバストなプラットフォームについて述べ,種々の条件下で個々の細胞の10s-1000sにおけるROS測定を行った。試料タイプ(例えば,細菌種,ストレス条件)の間の偽陽性と変動性は,側面と前方散乱光(形態変化),バックグラウンド蛍光,DNA含有量,および染料取込を説明する柔軟な4段階ゲーティング方式で減少し,ROSを産生する細胞を同定する。大腸菌,Mycobacterium smegmatisおよびMycobacterium bovis BCGを多様なモデル細菌として用いて,(1)スーパーオキシドに対する定量可能なCellROXグリーンシグナルの生成を示したが,過酸化水素誘導ヒドロキシルラジカルではなく,この染料をスーパーオキシド検出器として検証した。(2)染料検出可能なスーパーオキシドのレベルは細胞毒性または抗生物質感受性と相関しない;(3)非複製,栄養素欠乏マイコバクテリアの抗生物質耐性状態は,高レベルのスーパーオキシドと関連している;そして,(4)スーパーオキシドの抗生物質誘導生産は,細菌の種と生理学的状態の両方に関して特異的である。また,このゲーティング法は,細胞エステラーゼおよび還元的呼吸活性に対して,それぞれ5-カルボキシフルオレセインジアセテートアセトキシメチルエステルおよび5-シアノ-2,3-ジトリルテトラゾリウム塩化物などの他の蛍光指示薬染料に適用できることを示した。これらの結果は,蛍光プローブと結合した適切に制御されたフローサイトメトリーが,ストレスを受けた細菌におけるROS生成と代謝変化の正確で正確な定量的分析を提供することを示す。Copyright 2018 The Author(s). All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： DNA【核酸】 ,  *最適化 ,  代謝 ,  *フローサイトメトリー ,  抗生物質 ,  *蛍光 ,  大腸菌 ,  ヒドロキシルラジカル ,  定量的分析 ,  細胞毒性 ,  過酸化水素 ,  *蛍光染料 ,  *超酸化物 ,  酸化ストレス
準シソーラス用語： ストレス応答 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： 活性酸素種(ROS) ,  フローサイトメトリー ,  細菌 ,  酸化ストレス ,  飢餓 ,  抗生物質

分類 (3件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  植物の生化学  (EH01050J) ,  細胞構成体一般  (EF03010Z)

タイトルに関連する用語 (12件)： 細菌 ,  スーパーオキシド ,  ストレス ,  細胞 ,  状態依存性 ,  蛍光染料 ,  ROS ,  アーチファクト ,  最小化 ,  ゲート ,  最適化 ,  フローサイトメトリー