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J-GLOBAL ID：201802232055504094   整理番号：18A1586552

ミツバチ幼虫のメタロプロテイナーゼ遺伝子の原核発現およびポリクローナル抗体の調製【JST・京大機械翻訳】

Prokaryotic Expression of Paenibacillus larvae Metalloprotease Gene and Preparation of Polyclonal Antibodies

著者 (6件)： Ge Ting (新疆農業大学動物医学学院,新疆烏魯木斉,830052) ,  He Xiaojie (伊犁職業技術学院,新疆伊寧,835000) ,  Ye Erbaolei (伊犁出入境検験検疫局,新疆伊寧,835000) ,  A Sika・xiarefuhan (伊犁出入境検験検疫局,新疆伊寧,835000) ,  Lei Chenghong (新疆農業大学動物医学学院,新疆烏魯木斉,830052) ,  Wang Zhenbao (新疆農業大学動物医学学院,新疆烏魯木斉830052;伊犁出入境検験検疫局,新疆伊寧835000)
資料名： Dongwu Yixue Jinzhan  (Dongwu Yixue Jinzhan)
巻： 39  号： 5  ページ： 49-54  発行年： 2018年 
JST資料番号： C3581A  ISSN： 1007-5038  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： ミツバチ幼虫の金属プロテアーゼ遺伝子PLMPをクローンし、その原核発現ベクターを構築後、組換えタンパクの発現及び精製を行い、ウサギを接種してポリクローナル抗体を作製し、幼虫の桿菌の迅速検出方法の研究に基礎を築いた。PLMP遺伝子をPCRにより増幅し,発現ベクターpGEX-4T-1にクローン化し,E.coliBL21(DE3)に形質転換した。異なる誘導時間、IPTG濃度により、PLMP組み換え蛋白を発現させ、SDS-PAGE電気泳動ゲルで精製目的タンパク質を回収した。標的蛋白質を用いてウサギを4回免疫した後、血清を採集し、多耐性を作製した。1242bpのPLMP遺伝子フラグメントをPCRにより増幅した。原核生物発現ベクターpGEX-4T-1-PLMPを構築し,最終濃度0.8mmol/LのIPTGと37°Cで5時間の誘導後,分子量70kuの蛋白質を得た。標的蛋白質で免疫化したウサギからのポリクローナル抗体の力価は1:1であった。12800、Westernblotによりバンドを検出し、作製した多抗はPLMP抗原の検出に使用できることを証明した。【結果】PLMPの原核生物ベクターを,PLMP蛋白質を得るために構築し,そして,PLMPポリクローナル抗体を,PLMP蛋白質を得るために確立し,そして,PLMPの迅速検出法の基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ミツバチ ,  桿菌属 ,  *幼虫 ,  血清 ,  SDS-PAGE ,  タンパク質 ,  クローン ,  *遺伝子 ,  ベクター ,  形質転換 ,  *ポリクローナル抗体 ,  原核生物 ,  多剤耐性 ,  抗原
準シソーラス用語： 発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (5件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  ウイルス学一般  (EG04010J) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  抗原・抗体・補体一般  (ED04010A) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

タイトルに関連する用語 (7件)： ミツバチ ,  幼虫 ,  メタロプロテイナーゼ ,  遺伝子 ,  発現 ,  ポリクローナル抗体 ,  調製