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J-GLOBAL ID：201802234281882612   整理番号：18A0475247

Sf9昆虫細胞を用いた抗癌ワクチン候補のGA733-Fcの組換蛋白質発現を最適化するためのMOI値に基づくバキュロウイルス滴定法【Powered by NICT】

Baculovirus titration method based on MOI values for optimizing recombinant protein expression of the anti-cancer vaccine candidate GA733-Fc using Sf9 insect cells

著者 (8件)： Moussavou Ghislain (Department of Nano-Bioengineering, College of Life Sciences and Bioengineering, Incheon National University, Incheon, Republic of Korea) ,  Lee Jeong-Hwan (Department of Medicine, Therapeutic Protein Engineering Lab, College of Medicine, Chung-Ang University, Seoul, Republic of Korea) ,  Qiao Lu (Laboratory of Molecular Genetics and Genomics, School of Biological Sciences, Seoul National University, Seoul, Republic of Korea) ,  Noh Yoo Hun (Department of Anatomy and Cell biology, College of Medicine, Chung-Ang University, Seoul, Republic of Korea) ,  Shin Yong Kyoo (Department of Pharmacology, College of Medicine, Chung-Ang University, Seoul, Republic of Korea) ,  Lee Tae Jin (Department of Pathology, College of Medicine, Chung-Ang University, Seoul, Republic of Korea) ,  Lee Seung Ho (Department of Nano-Bioengineering, College of Life Sciences and Bioengineering, Incheon National University, Incheon, Republic of Korea) ,  Ko Kisung (Department of Medicine, Therapeutic Protein Engineering Lab, College of Medicine, Chung-Ang University, Seoul, Republic of Korea)
資料名： Entomological Research  (Entomological Research)
巻： 48  号： 1  ページ： 73-79  発行年： 2018年 
JST資料番号： W2560A  ISSN： 1738-2297  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： バキュロウイルス発現系は組換バイオ医薬品蛋白質の生産のための非常に効率的な手段と考えられている。組換え抗原性糖蛋白質GA733はヒト結腸直腸癌で強く発現される細胞表面蛋白質である。感染(MOI)条件の最適多重度,順番にバキュロウイルス-昆虫系におけるヒト免疫グロブリンIgG Fcフラグメント(GA733 Fc)に融合した組換GA733の強い発現に必須であることを達成するために確立すべきである効率的なウイルス滴定。本研究では,Sf9細胞株はバキュロウイルス多面体プロモーターの制御下でのGA733-Fc発現カセットを含むプラスミドDNAをトランスフェクトした。MOI値(0.05,0.1,0.5年,1年,および3)を滴定分析の顕微鏡観察と結果に基づいて計算し,最適組換発現と収穫した試料[細胞培養培地(CM)または細胞溶解物(CL)]を決定するために用いた。GA733-Fc遺伝子を持つpFastBacTM二重ベクターはGA733-Fcを発現し,組換バキュロウイルスを生成した。ウェスタンブロット法の結果は,組換え蛋白質の発現はMOIに依存することを示した。添加では,CMとCLは蛋白質合成と蛋白質分泌能の有意差を示した。著者らの知見は,筆者らが提案した滴定法はMOI値の信頼できる計算,バキュロウイルス-昆虫細胞系における組換GA733-Fc蛋白質発現に顕著に影響するに用いることができることを示唆した。Copyright 2018 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： ベクター ,  ウェスタンブロット法 ,  *最適化 ,  プロモーター領域 ,  *ウイルス ,  *組換タンパク質 ,  *昆虫類 ,  免疫グロブリンG ,  *バキュロウイルス科 ,  タンパク質合成 ,  ヒト
準シソーラス用語： *蛋白質発現 ,  Sf9細胞 ,  *昆虫細胞 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： バキュロウイルス ,  Fc融合蛋白質 ,  GA733 ,  MOI ,  組換蛋白質 ,  titration

分類 (3件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  動物組織・細胞による物質生産  (FK03060S) ,  ウイルスの生化学  (EG04030F)

タイトルに関連する用語 (6件)： 昆虫細胞 ,  癌ワクチン ,  組換蛋白質発現 ,  最適化 ,  バキュロウイルス ,  滴定法