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J-GLOBAL ID：201802234316556041   整理番号：18A1007226

酵母Pichia pastorisにおけるヒトプロレキシンH2の生産【JST・京大機械翻訳】

Production of human pro-relaxin H2 in the yeast Pichia pastoris

著者 (14件)： Cimini D. (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Corte K. Della (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Finamore R. (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Andreozzi L. (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Stellavato A. (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Pirozzi A. V. A. (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Ferrara F. (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Formisano R. (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Rosa M. De (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy) ,  Chino M. (Department of Chemical Sciences, University of Naples Federico II, Naples, Italy) ,  Lista L. (Department of Chemical Sciences, University of Naples Federico II, Naples, Italy) ,  Lombardi A. (Department of Chemical Sciences, University of Naples Federico II, Naples, Italy) ,  Pavone V. (Department of Chemical Sciences, University of Naples Federico II, Naples, Italy) ,  Schiraldi C. (Department of Experimental Medicine, Section of Biotechnology and Molecular Biology, Second University of Naples and University of Campania Luigi Vanvitelli, Naples, Italy)
資料名： BMC Biotechnology (Web)  (BMC Biotechnology (Web))
巻： 17  号： 1  ページ： 4  発行年： 2017年 
JST資料番号： U7348A  ISSN： 1472-6750  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 背景:生殖ホルモンとして知られているリラキシンは,細胞外マトリックスリモデリング,抗炎症,抗虚血および血管新生効果を含む他の治療的に有用な性質を有することが示されている。これらのすべての知見は,様々な医療応用のための潜在的な薬物を緩和する。その前駆体,プロレキシンは,in vitroアッセイで活性を示す18kDa蛋白質である。動物組織からのリラキシンの抽出はいくつかの問題を提起するので,原核生物と真核生物は両方とも組換えリラキシン生産のための発現系として使用された。大腸菌を宿主として用いたとき,ヒトのリラキシン発現のために最も生産的な結果が得られた。しかし,このような宿主において,レキシンは封入体の形で沈殿し,それ故,細胞溶解,再折畳み及び還元としていくつかの高価な回復段階を必要とした。【結果】原核生物発現に関連する問題を克服するために,発現宿主としてメチロトローフ酵母Pichia pastorisを使用することによって,分泌されたヒトプロレキシンH2の生産と精製を報告する。メタノール誘導プロモーターAOX1を用いて,22Lスケールにおける二相流加実験におけるプロレキシンH2の天然及びヒスチジン標識型の発現を駆動した。両蛋白質型は質量分析とウェスタンブロット分析により決定されたように正確な構造を示し,免疫酵素アッセイにおいて生物学的に活性であることを示した。タグの存在は,より高い純度を得るプロレキシン精製を単純化することを可能にした。【結論】本研究は,生物学的に活性なプロホルモンの獲得を可能にするPichia pastorisにおける組換えヒトプロレキシンH2の微生物生産のための戦略を示し,デンシトメトリー分析によって決定されたように,10~14mg/Lの生産物の最終濃度を得た。Copyright 2018 The Author(s). All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ヒト ,  ウェスタンブロット法 ,  消炎作用 ,  真核生物 ,  *Pichia ,  細胞外マトリックス ,  大腸菌 ,  リラキシン ,  純度 ,  in vitro実験 ,  原核生物 ,  質量分析 ,  治療法 ,  タンパク質
準シソーラス用語： *Pichia pastoris , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： プロリラキシン ,  プロホルモン ,  蛋白質不安定性 ,  Pichia pastoris ,  IMAC ,  LCMS

分類 (4件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

引用文献 (34件)：

• Biol Reprod; Identification of specific relaxin-binding cells in the cervix, mammary glands, nipples, small intestine, and skin of pregnant pigs; G Min, OD Sherwood; 55; 1996; 1243-1252; 10.1095/biolreprod55.6.1243; CR1;
• Nature; Structure of a genomic clone encoding biologically active human relaxin; P Hudson, J Haley, M John, M Cronk, R Crawford, J Haralambidis, G Tregear, J Shine, H Niall; 301; 1983; 628-631; 10.1038/301628a0; CR2;
• Curr Heart Fail Rep; Relaxin: review of biology and potential role in treating heart failure; SL Teichman, E Unemori, JR Teerlink, G Cotter, M Metra; 7; 2010; 75-82; 10.1007/s11897-010-0010-z; CR3;
• J Orthop Res; Down-regulation of collagen synthesis and matrix metalloproteinase expression in myofibroblasts from Dupuytren nodule using adenovirus-mediated relaxin gene therapy; YM Kang, YR Choi, CO Yun, JO Park, KS Suk, HS Kim, MS Park, BH Lee, HM Lee, SH Moon; 32; 2014; 515-523; 10.1002/jor.22535; CR4;
• Cardiovasc Hematol Agents Med Chem; Serelaxin: new investigational treatment in acute heart failure; S Said, D Mukherjee; 11; 2013; 243-248; 10.2174/1871525711666131128144132; CR5;

タイトルに関連する用語 (3件)： 酵母 ,  Pichia ,  H2