抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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背景:骨髄間葉系幹細胞の由来は限られており、しかも数回の体外継代培養の過程において、その細胞形態、増殖及び多分化能は変化する。目的;線維芽細胞増殖因子が複数回の継代、細胞形態の変化を経る骨髄間葉系幹細胞の形態、増殖及び多分化能への影響を検討する。方法;(1)ラット骨髄間葉系幹細胞をin vitroで培養し,連続的に6回培養し,細胞形態変化を観察した。(2)第6世代の細胞を96穴プレートに接種し、無作為に対照群と線維芽細胞増殖因子処理群に分け、相応に1、2、3、4、5、6、7日後、CCK-8キットを用いて細胞増殖状況を測定した。(3)第6世代の細胞を6つのプレートに接種し,対照群と線維芽細胞増殖因子処理群に分け,通常の培地と線維芽細胞増殖因子培地を用いて7日間培養し,骨,脂肪,軟骨誘導培地により7日間培養した。蛍光定量PCR法により骨形成(RUNX2、ALP、OCN)、脂肪生成(PPARγ2、AP2、ADIPOQ)、軟骨形成(SOX9、Col agen II、aggrecan)関連遺伝子の発現を測定した。ウェスタンブロット法を用いてRUNX2,PPARγ2,SOX9蛋白質の発現を検出した。(4)第6世代の細胞を6穴細胞培養プレートに接種し、無作為に対照群と線維芽細胞増殖因子処理群に分け、それぞれ普通の生長培地及び繊維芽細胞増殖因子を含む生長培地で7日間培養し、骨形成、脂肪形成、軟骨誘導培地で14日間培養した。アリザリンレッド染色,オイルレッドO染色,およびアリーレンブルー染色を行った。結果と結論;(1)連続6回の継代培養により,骨髄間葉系幹細胞の形態は明らかに変化し,線維芽細胞増殖因子処理7日後にその形態は次第に回復した。(2)対照群と比較して,培養3-7日目の線維芽細胞増殖因子処理群の細胞増殖速度は有意に増加し,有意差が認められた(P<0.05)。3)対照群と比較した。線維芽細胞増殖因子処理群の細胞骨形成関連遺伝子(RUNX2,ALP,OCN),脂肪関連遺伝子(PPARγ2,AP2,ADIPOQ),軟骨形成関連遺伝子(SOX9,colagen 2,aggrecan)の発現は明らかに上昇した。それらの間に有意差があった(P<0.05)。(4)線維芽細胞増殖因子処理群におけるRUNX2,PPARγ2,SOX9蛋白質の発現は,対照群におけるそれらより有意に高かった(P<0.05)。5)対照群と比較して,線維芽細胞増殖因子の前処理群の細胞外カルシウム結節の数,細胞内脂肪滴の数,細胞の酸性粘着性多糖類の発現は明らかに増加した。結果は,線維芽細胞増殖因子が骨髄間葉系幹細胞の幹細胞特性を維持することができることを示した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
