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J-GLOBAL ID：201802235006267636   整理番号：18A1965472

Bc48遺伝子のクローニング,発現,およびポリクローナル抗体の調製を,Bc48遺伝子のクローニング,発現,および発現に関して研究した。【JST・京大機械翻訳】

Cloning and Expression of Bc48 Gene of Babesia caballi Xinjiang Yili Strain and Preparation of Its Polyclonal Antibody

著者 (8件)： Wang Panju (新疆農業大学動物医学学院,烏魯木斉,830052) ,  Ai Ridengcaicike (新疆維吾爾自治区動物衛生監督所,烏魯木斉,830011) ,  Xu Zhengmao (新疆農業大学動物医学学院,烏魯木斉,830052) ,  Wen Xiuxiu (新疆農業大学動物医学学院,烏魯木斉,830052) ,  Dang Nana (新疆和静県畜牧獣医站,和静,841300) ,  Song Jingjing (新疆農業大学動物医学学院,烏魯木斉,830052) ,  Zhang Mengyuan (新疆農業大学動物医学学院,烏魯木斉,830052) ,  Ba Yinchahan (新疆農業大学動物医学学院,烏魯木斉,830052)
資料名： Zhongguo Xumu Shouyi  (Zhongguo Xumu Shouyi)
巻： 45  号： 6  ページ： 1677-1682  発行年： 2018年 
JST資料番号： C3580A  ISSN： 1671-7236  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： Bc48遺伝子のBc48遺伝子を発現させ,GenBankのBc48遺伝子の配列に従って,Bc48ゲノムDNAをPCR増幅のために設計した;。増幅産物を原核生物発現ベクターpET-28a(+)にクローンし、陽性プラスミドを大腸菌BL21(DE3)コンピテント細胞に形質転換し、IPTG誘導後発現産物をSDS-PAGEで分析した。6週齢の雌BALB/cマウスを精製して,ポリクローナル抗体を調製した。この遺伝子を真核細胞発現ベクターpCMV-N-flagにクローン化し,大腸菌DH5aコンピテント細胞へ陽性プラスミドを形質転換し,pCMV-N-flag-Bc48プラスミドを293T細胞にトランスフェクトし,真核細胞発現させた。その結果,約15kuのサイズの融合蛋白質が得られ,予期した標的蛋白質のサイズと一致した。免疫BALB/eマウスから作製したポリクローナル抗体はELISAとWesternblottingにより検査・検証され、相応抗原を特異的に識別でき、その抗体価は1:1128000に達し、このポリクローナル抗体は高い抗体価と特異性を有することが明らかになった。真核生物発現プラスミドは293T細胞でBc48タンパク質を発現した。本試験は、ウマチバベリアの機能遺伝子のさらなる研究と快速な測定方法の確立に基礎を築くことができ、虫株の分類学と候補ワクチンの開発において重要な意義を持つ。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 大腸菌 ,  融合タンパク質 ,  真核細胞 ,  クローン ,  プラスミド ,  *ポリクローナル抗体 ,  ワクチン ,  原核生物 ,  真核生物 ,  抗体価 ,  PCR法 ,  *遺伝子 ,  形質転換
準シソーラス用語： 293T細胞 ,  *クローニング , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (6件)： 遺伝子 ,  クローニング ,  発現 ,  ポリクローナル抗体 ,  調製 ,  研究