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J-GLOBAL ID:201802235268582596   整理番号:18A0807242

樹木植物Tripterygium wilfordiiに対する遺伝子形質転換システムとその製品天然セラストロールへの応用【JST・京大機械翻訳】

Genetic Transformation System for Woody Plant Tripterygium wilfordii and Its Application to Product Natural Celastrol
著者 (6件):
資料名:
巻:ページ: 2221  発行年: 2017年 
JST資料番号: U7094A  ISSN: 1664-462X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: スイス (CHE)  言語: 英語 (EN)
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Tripterygium wilfordiiは,いくつかの重要な生物学的活性を有する多年生木質植物である。組織培養に関する研究は以前に行われてきたが,遺伝的形質転換に関する研究は非常に挑戦的であり,したがってより遅い進歩をもたらす。本研究において,PDS-1000/Heシステムを用いたレポーターegfp遺伝子によるT.wilfordiiの粒子衝撃を含む高効率形質転換システムを確立した。遺伝的形質転換に影響を及ぼす合計7つのパラメータを,L_18(6×3~6)型直交配列を用いて調査した。結果は,3cmのターゲット距離,1100psiのヘリウム圧力,28mmHgのチャンバー真空圧,3回の衝撃,CaCl_2の沈殿剤,2μgのプラスミドDNA濃度,および48時間のポスト衝撃培養時間のDNAデリバリー条件がT.wilfordii細胞懸濁液変換に最適であることを示した。平均変換効率は19.17%であった。この形質転換系に基づいて,2つのT.wilfordiiファルネシルピロりん酸シンターゼ遺伝子(TwFPSs)の過剰発現を細胞懸濁液中で行った。ゲノムにおけるTwFPSsの統合をPCR分析により,またプローブとしてハイグロマイシン遺伝子を用いたサザンブロットにより検証した。リアルタイム定量的PCR分析は,TwFPS1&2の発現が対照細胞と比較してトランスジェニック細胞懸濁液において高度に上方制御されていることを示した。代謝産物の検出は,TwFPS1&2がトランスジェニック細胞におけるセラストロール含有量(973.60μg/g)を高度に増加させることを示した。これらの結果は,この変換システムがテルペノイド生合成経路における遺伝子の機能を特性化するための有効なプロトコルであることを示した。Copyright 2018 The Author(s). All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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遺伝子操作 

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