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J-GLOBAL ID：201802236892571148   整理番号：18A0095514

【結語】:ヒツジUrNC1融合蛋白質の真核細胞発現を研究するために,この研究を実施した。【JST・京大機械翻訳】

著者 (5件)： Gao Baode (石河子大学生命科学学院,新疆石河子,832003) ,  Zhang Xiaoli (石河子大学動物科技学院,新疆石河子,832003) ,  Liu Haiyan (石河子大学動物科技学院,新疆石河子,832003) ,  Zhang Yanbing (石河子大学生命科学学院,新疆石河子,832003) ,  Sun Yanming (石河子大学動物科技学院,新疆石河子,832003)
資料名： Jiangsu Nongye Kexue  (Jiangsu Nongye Kexue)
巻： 45  号： 14  ページ： 130-133  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3714A  ISSN： 1002-1302  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 本研究の目的は,ヒツジにおけるSPLUNC1遺伝子の真核生物発現ベクターを構築し,Pichia pastorisにおける全RNAを抽出し,cDNAに逆転写することである。このcDNAをテンプレートとして逆転写PCR(RT-PCR)法により、ヤギの交雑ヤギSPLUNC1遺伝子のオープンリーディングフレームをクローニングし、pPIC9Kベクターにクローニングし、真核細胞発現ベクターpPIC9K-SPLUNC1を構築した。組換え型プラスミドをPichia pastoris GS115に形質転換し,発現産物をNi-NTAアフィニティークロマトグラフィーにより精製し,ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)とウェスタンブロット法(Western Blot)により検出した。結果により、目的遺伝子のサイズは758bpであり、組み換え発現プラスミドpPIC9K-SPLUNC1はダブル酵素消化、PCR及びシークエンシングにより構築に成功したことが分かった。発現産物はSDS-PAGE分析により、大きさは25.96 kuの目的バンドがあり、72時間で発現量が最も大きいことが分かった。精製後,SDS-PAGEとWestern Blot分析により、大きさは25.96kuの目的バンドがあることが分かった。研究結果により、真核細胞発現システムを用いて、in vitroで成功的に発現することができ、また、羊の交雑羊rSPLUNC1タンパク質を純化し、羊羊交雑ヤギSPLUNC1タンパクの生物学的機能を深く研究するために基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *真核細胞 ,  交雑 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  ベクター ,  ウェスタンブロット法 ,  遺伝子 ,  cDNA ,  SDS-PAGE ,  形質転換 ,  酵素的分解 ,  逆転写 ,  プラスミド
準シソーラス用語： クローニング ,  Pichia pastoris ,  発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (3件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

タイトルに関連する用語 (6件)： ヒツジ ,  融合蛋白質 ,  真核細胞 ,  発現 ,  研究 ,  実施