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J-GLOBAL ID:201802237839450047   整理番号:18A1975871

INS-1細胞中の膵臓組織のチオレドキシン相互作用蛋白過剰発現モデル:2種類のアデノウイルス感染方法の差異【JST・京大機械翻訳】

Differences in the construction of thioredoxin-interacting protein overexpression model in INS-1 cells by two adenovirus infection methods
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資料名:
巻: 22  号: 28  ページ: 4487-4492  発行年: 2018年 
JST資料番号: C4013A  ISSN: 2095-4344  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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背景:現在、アデノウイルスの感染方法による細胞中のタンパク質の過剰発現モデルを構築する方法は主に2種類があり、一つはアデノウイルス感染細胞の4時間後に1640完全培地を補充し、24時間後に完全培地に転換し、再び48時間(方法I)に培養する。もう1つはアデノウイルス感染細胞の4h後にPBSでアデノウイルスを含む1640の培地を洗浄し、4mLの完全培地を48時間培養し、中間は何も処理しない(方法II)。前者ウイルスの作用時間は長く、感染効果は良いが、ウイルス自体は細胞の損害程度が大きく、実験モデルの安定性に干渉が生じる。一方、後者のウイルスの作用時間は短く、細胞への毒性は低いが、ウイルスの感染効率は低く、目的蛋白の発現効果は良くない。目的;ラットINS-1ランゲルハンス島β細胞において、同じアデノウイルスベクターにより媒介される異なる感染細胞を比較する方法を通じて、より安定かつ高効率のチオレドキシン相互作用タンパク質(Thioredoxin-interactingprotein)を探った。TXNIP過剰発現モデル。方法:緑色蛍光タンパク質を含むアデノウイルスベクター(Ad-GFP)とTXNIP過剰発現アデノウイルスベクター(Ad-TXNIP-GFP)を構築した。正常群、空ウイルス群、TXNIP過剰発現群をそれぞれ確立し、上述の2種類の異なる方法でウイルスのトランスフェクションを行った。結果と結論:1方法IIの緑色蛍光蛋白の蛍光強度と陽性効率は方法Iより高く、2方法II中の細胞の形態がもっと良く、細胞の生存率がもっと高く、3方法IIの中で、目的遺伝子TXNIPはmRNAレベルとタンパク質レベルの表現情況は方法Iより明らかに高い。以上の結果から、アデノウイルスがINS-1細胞を感染させた4時間後に、PBSを用いて旧培地を洗浄し、さらに新しい培地を交換し、さらに48時間培養する方法は、INS-1細胞中のTXNIP過剰発現モデルの作成に有利であった。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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JSTが定めた文献の分類名称とコードです
細胞生理一般  ,  分子遺伝学一般 

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