文献

J-GLOBAL ID：201802238269151912   整理番号：18A1296195

CRISPR-Cas9システムによるUstilaginoidea virensにおいて効率的なUSTAおよびUVSLT2遺伝子の標的化欠失【JST・京大機械翻訳】

Targeted Deletion of the USTA and UvSLT2 Genes Efficiently in Ustilaginoidea virens With the CRISPR-Cas9 System

著者 (6件)： Liang Yafeng (State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Purdue-NWAFU Joint Research Center, College of Plant Protection, Northwest A&F University) ,  Han Yu (State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Purdue-NWAFU Joint Research Center, College of Plant Protection, Northwest A&F University) ,  Wang Chenfang (State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Purdue-NWAFU Joint Research Center, College of Plant Protection, Northwest A&F University) ,  Jiang Cong (State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Purdue-NWAFU Joint Research Center, College of Plant Protection, Northwest A&F University) ,  Xu Jin-Rong (State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas, Purdue-NWAFU Joint Research Center, College of Plant Protection, Northwest A&F University) ,  Xu Jin-Rong (Department of Botany and Plant Pathology, Purdue University)
資料名： Frontiers in Plant Science (Web)  (Frontiers in Plant Science (Web))
巻： 9  ページ： 699  発行年： 2018年 
JST資料番号： U7094A  ISSN： 1664-462X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Ustilaginoidea virensは,イネの主要な菌類病の1つであるイネの偽のsmの原因物質である。しかしながら,標的遺伝子破壊突然変異体を生成するための効率的なアプローチの欠如により,この重要な病原体による分子研究は限られている。本研究では,USTA ustiloxinとUvSLT2 MAPキナーゼ遺伝子を欠失した突然変異体を効率的に産生するために,CRISPR-Cas9システムを用いた。USTA,UA01,UA13,およびUA21の3つのgRNAスペーサをGln-tRNAのRNAP IIIプロモーターで発現させた。それらの全てについて,相同遺伝子置換頻度は,Cas9とgRNA構築物が,連続的に同じベクター上でU.virensに変換されたとき,より高かった。最高のオンターゲットスコアを持つスペーサであるUA01は90%の最も高いノックアウト頻度を有し,USTA突然変異体を生成するためのAgrobacterium tumefaciens仲介形質転換(ATMT)のそれより200倍以上高かった。これらのUSTAスペーサのいずれも,1または2-nt変異を有するオフターゲットを予測しなかった。3または4-nt変異を有する予測されたオフターゲットに対して,変異はスペーサUA13またはUA21により生成された10のUSTA変異体で検出されず,U.virensにおける比較的低い周波数オフ標的突然変異を示した。UvSLT2に対して,相同遺伝子置換頻度は,CRISPR-Cas9による50%であり,ATMTのそれより有意に高かった。USTA変異体は検出可能な表現型を持たなかったが,Uvslt2変異体は増殖速度がわずかに減少し,分生子形成において70%以上減少した。UvSLT2の欠失も細胞壁ストレスに対する感受性を増加させたが,高浸透圧または酸化ストレスに対する耐性を増加させた。まとめると,著者らの結果は,CRISPR-Cas9システムがU.virensにおける効率的な遺伝子置換または編集アプローチとして使用でき,UvSlt2 MAPキナーゼ経路は細胞壁完全性において保存された役割を有することを示した。Copyright 2018 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 形質転換 ,  ベクター ,  tRNA ,  表現型 ,  突然変異 ,  病原体 ,  *ターゲティング ,  スペーサ ,  酸化ストレス ,  変異 ,  細胞壁 ,  感受性 ,  MAPキナーゼ ,  プロモーター領域
準シソーラス用語： *Cas9 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 米の偽のsm ,  MAPキナーゼ ,  病因 ,  遺伝子ノックアウト ,  ustiキシン

分類 (5件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  遺伝学研究法  (EC01020N) ,  遺伝的変異  (EC01030Y) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (4件)： CRISPR-Cas9システム ,  遺伝子 ,  標的化 ,  欠失