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J-GLOBAL ID:201802239642192321   整理番号:18A1875670

液滴マイクロフルイディクスによるリポプレックス媒介単一細胞トランスフェクション【JST・京大機械翻訳】

Lipoplex-Mediated Single-Cell Transfection via Droplet Microfluidics
著者 (6件):
資料名:
巻: 14  号: 40  ページ: e1802055  発行年: 2018年 
JST資料番号: W2348A  ISSN: 1613-6810  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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リポプレックス(カチオン性脂質-核酸複合体)仲介細胞内デリバリーは哺乳類細胞トランスフェクションに広く採用されているが,懸濁細胞,例えばリンパ球および造血細胞に対するそのトランスフェクション効率は約5%またはそれより低いだけで報告されている。ここでは,効率的で一貫したリポプレックス仲介トランスフェクションを,単一細胞,液滴-マイクロフルイディクスアプローチを介し,ハードからトランスフェクションした懸濁細胞に対し示した。これらの微小液滴において,効果的な遺伝子デリバリーのための単分散リポプレックスは,蛇行マイクロチャネルにより誘導されたカオス的混合により生成され,単一細胞と共拘束される。さらに,細胞膜透過性は,液滴ピンチオフ接合を通過するとき,単一セルに及ぼすせん断応力のために増加した。pcDNA3-EGFPプラスミドのデリバリーにより調べたトランスフェクション効率は,バルク法と比較して,3種の試験した懸濁細胞系,すなわちK562,THP-1,Jurkatおよび有意に減少した細胞間変異のいずれに対しても約5%から≒50%に改善した。このプラットフォームを用いて,CRISPR(クラスター化した規則的に間隔の短いパリンデミック反復)-CAS9(CRISPR関連ヌクレアーゼ9)機構を介して,K562細胞に対するTP53BP1遺伝子の効率的な標的ノックアウトを達成した。液滴マイクロフルイディクスを介したリポプレックス仲介単一細胞トランスフェクションは,高いトランスフェクション効率と低い細胞から細胞への変化を与えることにより,遺伝子治療と再生医療に広い応用を有することが期待されている。Copyright 2018 Wiley Publishing Japan K.K. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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遺伝子操作 
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