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J-GLOBAL ID:201802241550182646   整理番号:18A0930190

OPP標識は単一細胞レベルでCHO生産細胞株における全蛋白質合成定量化を可能にする【JST・京大機械翻訳】

OPP Labeling Enables Total Protein Synthesis Quantification in CHO Production Cell Lines at the Single-Cell Level
著者 (11件):
資料名:
巻: 13  号:ページ: e1700492  発行年: 2018年 
JST資料番号: W2514A  ISSN: 1860-6768  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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全体的および特異的蛋白質合成速度の正確な測定は,特にプロセスモデリングまたは生産細胞クローンの選択のようなバイオテクノロジー応用の文脈において,ますます重要になっている。全細胞集団にわたる全蛋白質翻訳の定量化は容易に達成されるが,単一細胞レベルでの集団動力学を追跡できる方法はまだ不足している。この必要性を扱うために,フローサイトメトリーにより単一組換えチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞における全蛋白質合成を評価するためにO-プロパルギル-ピューロマイシン(OPP)標識を適用した。それにより,全体的蛋白質翻訳速度は指数増殖時の細胞周期を通して進行と共にわずかに増加することを示した。組換え蛋白質を産生する安定なCHO細胞株は,親CHO宿主細胞株と同じレベルの総蛋白質合成を示す。全体的蛋白質翻訳は3つのモデル蛋白質の細胞内生成物含有量と相関しないが,高い一時的生産性を有する宿主細胞株はより高いOPPシグナルを有する。これは,全蛋白質合成能の増加を伴う生産細胞系が,単一細胞レベルでの著者らの方法により同定できることを示す。結論として,OPP標識は,単一CHO細胞における全体的蛋白質合成の迅速で再現性のある評価を可能にし,DNA染色または特異的蛋白質またはオルガネラのマーカーの免疫標識化により多重化することができる。Copyright 2018 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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バイオアッセイ 

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