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J-GLOBAL ID:201802242785006758   整理番号:18A0767350

ヒト胎盤胎児側間葉系幹細胞の無血清培養上清による肺上皮細胞の酸化ストレスへの保護作用【JST・京大機械翻訳】

Protective role of serum-free supernatant of human placental fetal mesenchymal stem cells against oxidative stress injury to lung epithelial cells
著者 (7件):
資料名:
巻: 21  号: 33  ページ: 5369-5374  発行年: 2017年 
JST資料番号: C4013A  ISSN: 2095-4344  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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背景:以前の研究により、ヒト胎盤の胎児側間葉系幹細胞培養上清は一定の活性酸素フリーラジカルを除去する能力を有し、しかも自身は一定の抗酸化酵素活性を有することが証明された。目的;ヒト胎児胎盤の間葉系幹細胞が無血清培養条件下で得られた上清が酸化ストレスによる損傷した肺上皮細胞に対する保護作用及びその作用機序を探求する。方法;異なる濃度の過酸化水素(200,400,500,600,800μmol/L)を用いて,肺上皮細胞A549細胞に対して6,12,24時間の酸化刺激を行い,CCK-8法により肺上皮細胞の生存率を測定した。50%の生存率を有する過酸化水素の濃度は,酸化損傷モデルの最適条件として得られた。Hochest33258染色とWestern Blotを用いてモデルの有効性を検証した。無血清培地を用いて、胎盤胎児側間葉系幹細胞を培養し、P3代細胞培養上清を収集し、それを酸化損傷の肺上皮細胞に作用させ、24時間培養し、上清群を培養した。同時に、損傷群(酸化損傷のみ)とビタミンC群(培養基に100μmol/LのビタミンCを添加)を設定した。フローサイトメトリーを用いて,各群の細胞アポトーシスを検出し,ウェスタンブロット法を用いて,アポトーシス関連蛋白質と酸化ストレスの古典的シグナル経路におけるNrf2-Kap1-AREシグナル伝達経路関連蛋白質の発現を検出した。結果と結論;(1)CCK-8法により,600μmol/Lの過酸化水素を用いて,24時間酸化された肺上皮細胞に対して酸化的刺激を行った。A549細胞の生存率は(56.41±3.31)%であり,Hochest33258染色とWestern Blotは,モデルの信頼性を確認した。(2)フローサイトメトリーの結果は,ビタミンC群と上清群における酸化損傷細胞のアポトーシス率が,損傷群におけるそれらと比較して有意に減少することを示し,上澄み群と損傷群の間に統計的有意差があった(P<0.05)。3)アポトーシス関連蛋白質の検出により,ビタミンC群と上清群のアポトーシス促進遺伝子Bax蛋白質の発現が減少し,アポトーシス抑制遺伝子Bcl-2蛋白質の発現が増加したことを示した。【結果】Nrf2-Keap1-AREシグナル伝達経路関連蛋白質の発現は,損傷群と比較して,ビタミンC群と上清群において有意に増加し,Keap1発現は減少し,有意差があった(P<0.05)。上記の結果により、実験により肺上皮細胞損傷モデルを構築することができ、しかもヒト胎盤の胎児側間葉系幹細胞培養上清は一定の抗酸化能力を有し、酸化損傷を軽減し、細胞アポトーシスを抑制できる作用があることが明らかになった。その作用機序は,Nrf2-Kap1-AREシグナル伝達経路の活性化と関連している可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】
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分類 (3件):
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金属及び金属化合物の毒性  ,  細胞・組織培養法  ,  動物に対する影響 

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