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J-GLOBAL ID：201802242792089192   整理番号：18A1165937

融合タンパク質TAT-RabGEF1の原核生物発現ベクターの構築と発現。【JST・京大機械翻訳】

Construction of Prokaryotic Expression Vector,Expression,Purification,and Identification of Fusion Protein,TAT-RabGEF1

著者 (4件)： Fang Hongyi (中山大学附属第三医院麻醉科,广東 广州,510630) ,  Guo Na (中山大学附属第三医院麻醉科,广東 广州,510630) ,  Xing Jibin (中山大学附属第三医院麻醉科,广東 广州,510630) ,  Luo Chenfang (中山大学附属第三医院麻醉科,广東 广州,510630)
資料名： Zhongshan Daxue Xuebao. Yixuekexueban  (Zhongshan Daxue Xuebao. Yixuekexueban)
巻： 39  号： 1  ページ： 61-67  発行年： 2018年 
JST資料番号： C2599A  ISSN： 1672-3554  CODEN： ZYXUEC  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】PET28a-TAT-RabGEF1組換え型プラスミドベクターを構築し,E.coliRosetta(DE3)株に融合蛋白質を発現させ,精製した。[方法]マウス組織cDNAをテンプレートとし、上流と下流に制限酵素部位とTAT配列を含むプライマーを設計し、PCR増幅目的断片TAT-RabGEF1を増幅した。組換えプラスミドpET28a-TAT-Rab-GEF1は,E.coliRosetta(DE3)の大腸菌で発現された。融合蛋白質の細胞毒性を,CCK-8によって検出し,そして,P815の活性を,蛍光顕微鏡および蛍光分光光度計によって,定量的に観察した。【結果】PET28a-TAT-RabGEF1の組換えベクターを成功裏に構築し,高い特異性を示した。分子量が約57kuの融合蛋白質TAT-RabGEF1,0.1,1,10μmol/LのTAT-RabGEF1は細胞に対して明らかな毒性を示さなかった。[結論]TAT-RabGEF1の原核発現及び蛋白質精製分析により、TAT-PTDの膜貫通伝導活性を確認した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 蛍光 ,  cDNA ,  大腸菌 ,  DNA制限酵素 ,  分子量 ,  蛍光顕微鏡 ,  *原核生物 ,  *融合タンパク質 ,  PCR法 ,  分光光度計 ,  細胞毒性
準シソーラス用語： 蛋白質精製 ,  特異性 ,  プラスミドベクター ,  *発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： RabGEF1 ,  TAT protein ,  fusion protein ,  vector construction

分類 (4件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  抗腫よう薬の基礎研究  (GW16010A) ,  生物学的機能  (EB03040U) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

タイトルに関連する用語 (5件)： 融合タンパク質 ,  原核生物発現 ,  ベクター ,  構築 ,  発現