文献

J-GLOBAL ID：201802243198696356   整理番号：18A0654821

三次元共培養系における血管化に関する研究【JST・京大機械翻訳】

Experimental research of vascularization in three-dimensional co-cultured system

著者 (12件)： Yang Yixi (510150,广州医科大学附属第三医院骨科) ,  Yang Bo (510150,广州医科大学附属第三医院骨科) ,  Lou Aiju (510170,广州医学院茘湾医院風湿科) ,  Zhang Zheng (第二炮兵総医院心内科,北京,100088) ,  Lin Qiwang (510089,广州医科大学臨床医学系) ,  He Keren (510089,广州医科大学臨床医学系) ,  Cai Zihong (510089,广州医科大学臨床医学系) ,  Yin Biao (510150,广州医科大学附属第三医院骨科) ,  Li Shuangqing (510150,广州医科大学附属第三医院骨科) ,  Yang Fuguo (510150,广州医科大学附属第三医院骨科) ,  Guo Yuan (510150,广州医科大学附属第三医院口腔科) ,  Wang Le (510150,广州医科大学附属第三医院骨科)
資料名： Zhonghua Shiyan Waike Zazhi  (Zhonghua Shiyan Waike Zazhi)
巻： 34  号： 11  ページ： 1880-1884  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2337A  ISSN： 1001-9030  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:ヒト臍帯静脈内皮細胞(hUVECs)とヒト骨髄間葉系幹細胞(BMSCs)の三次元共培養系における血管網構造の形成可能性を検討する。方法:緑色蛍光蛋白質と赤色蛍光タンパク質を用いて、第4代のhUVECsと第4代のヒト骨髄間葉系幹細胞をトランスフェクションし、標記後の細胞をI型コラーゲン尾部に移植し、培養皿内で共培養した。5%のウシ胎児血清を含む内皮細胞培地(ECM)1mlを添加した。共培養2、4、7d及び単純細胞培養7d後に、レーザー走査共焦点顕微鏡により、二種類の細胞の相互形成ネットワークの状態及び両者の生長状況を観察した。MetaXpressソフトウェアシステムにおける血管生成分析モジュール(Angiogenesis)を用いて、生成した類血管網の構造の長さ値を計算し、DNA抽出法により細胞の活力と増殖レベルを分析した。血管内皮成長因子(VEGF)mRNAレベルとVEGF蛋白質レベルを,逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)とウエスタンブロット法によって検出した。結果:共培養2日後、BMSCsは明らかに延伸し始め、長い紡錘状を呈し、細胞間に凝集傾向がなかった。hUVECsの伸張は明らかではなく、わずかな細胞がわずかに延伸し、4d後のBMSCsの持続的な引張状態は明らかに凝集傾向があり、hUVECsの引張り状況は明らかで、凝集傾向があったが、2種類の細胞間には明らかな関係がなかった。7日後に,2つの細胞は,血管の構造を形成し,2つの細胞の間で相互に交差し,管状構造を形成し,DNA含有量は,7日以内に明らかな増殖を示し,細胞増殖は,純粋培養のゲル足場とは有意差がなかったことが示された。共培養の2,4,7日後に,RT-PCRとウェスタンブロット分析を行い,2日目の結果を比較することにより,2つの細胞株に対して,2つの細胞株に対して,2,4,7日後に検出されることが示された。4日目と7日目におけるVEGF mRNAの相対的発現は,それぞれ(2.1±0.1)倍と(5.2±0.2)倍増加した。7日後に,hUVECsと共培養したVEGF mRNAの相対的発現は,それぞれ,純粋なBMSCs(2.4±0.1)倍と(8.8±0.2)倍であった。結論:蛍光タンパク質で標識されたhUVECsとBMSCsはI型コラーゲン尾内において、その蛍光を維持し、生存でき、両者共培養系で三次元成長と自由延伸を行うことができ、7日後に明らかな相互作用が見られ、類血管ネットワーク構造が形成された。この共培養システムを用いることは有効で実行可能であり、しかもhUVECsとBMSCsが血管網構造を形成する中で重要な役割を果たしていることが明らかになった。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 細胞培養 ,  相互作用 ,  ウェスタンブロット法 ,  *三次元 ,  mRNA ,  緑色蛍光タンパク質 ,  血管新生 ,  *血管 ,  細胞増殖 ,  DNA【核酸】 ,  トランスフェクション ,  蛍光 ,  *共培養 ,  凝集 ,  ヒト

著者キーワード (4件)： Human umbilical vein endothelial cells ,  Human bone marrow mesenchymal stem cells ,  Type I rat tail collagen ,  Vascular network like structure

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  医用素材  (GA05040H)

タイトルに関連する用語 (3件)： 共培養 ,  血管 ,  研究