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J-GLOBAL ID：201802244008842910   整理番号：18A1721570

Cordyceps militaris由来のsn-1(3)位置選択性リパーゼのクローニングと蛋白質発現【JST・京大機械翻訳】

Cloning and protein expression of the sn-1(3) regioselective lipase from Cordyceps militaris

著者 (9件)： Park Jung Ha (Department of Agricultural Biotechnology, Seoul National University, Seoul 08826, Republic of Korea) ,  Park Kyung-Min (Department of Food Science and Biotechnology, Wonkwang University, Iksan 54538, Republic of Korea) ,  Chang Yoonjee (Department of Food Biosciences and Technology, College of Life Sciences and Biotechnology, Korea University, Seoul 02841, Republic of Korea) ,  Park Jun-Young (Department of Agricultural Biotechnology, Seoul National University, Seoul 08826, Republic of Korea) ,  Han Jaejoon (Department of Food Biosciences and Technology, College of Life Sciences and Biotechnology, Korea University, Seoul 02841, Republic of Korea) ,  Han Jaejoon (Department of Biotechnology, College of Life Sciences and Biotechnology, Korea University, Seoul 02841, Republic of Korea) ,  Chang Pahn-Shick (Department of Agricultural Biotechnology, Seoul National University, Seoul 08826, Republic of Korea) ,  Chang Pahn-Shick (Center for Food and Bioconvergence, Seoul National University, Seoul 08826, Republic of Korea) ,  Chang Pahn-Shick (Research Institute of Agriculture and Life Sciences, Seoul National University, Seoul 08826, Republic of Korea)
資料名： Enzyme and Microbial Technology  (Enzyme and Microbial Technology)
巻： 119  ページ： 30-36  発行年： 2018年 
JST資料番号： A0989B  ISSN： 0141-0229  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 本研究において,Cordyceps militaris由来のsn-1(3)位置選択性(すなわちsn-1またはsn-3特異性)を有する新規リパーゼの遺伝子を異種発現系により成功裏に発現した。全RNAをC.militarisから抽出し,次に一本鎖cDNAを合成した。結果として得られたC.militarisリパーゼ(CML)遺伝子を大腸菌発現プラスミド[pET-29b(+),pET-26b,pColdIII]に挿入し,CMLをコードするプラスミドを構築し,蛋白質発現のために大腸菌株BL21(DE3),C43(DE),C41(DE3),およびOrigami(DE3)に形質転換した。組換えCML発現レベルは高かったが,封入体の形で過剰生産された。特異的条件下で,組換えCMLの可溶型をウェスタンブロット分析を用いて検出した。しかし,酵素活性は観察されなかった。組換えCMLにおける翻訳後修飾の欠如を克服するために,バキュロウイルス-昆虫発現系を真核生物リパーゼ発現のために導入した。pDualBacを転写ベクターとして用い,CML遺伝子をポリヘドリンプロモーターの制御下で融合した。組換えバキュロウイルスを生成した後,CMLの活性型を成功裏に生産し,その速度論パラメータを決定した。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 酵素活性度 ,  バキュロウイルス科 ,  プラスミド ,  翻訳後修飾 ,  ベクター ,  大腸菌 ,  昆虫類 ,  真核生物 ,  遺伝子 ,  ウェスタンブロット法 ,  *リパーゼ ,  cDNA
準シソーラス用語： *トウチュウカソウ属 ,  異種発現 ,  *Cordyceps militaris , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： SN-1(3)位置選択性リパーゼ ,  位置特異性 ,  Cordyceps militaris ,  蛋白質発現 ,  バキュロウイルス

分類 (3件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  微生物代謝産物の生産  (FK03020A) ,  微生物酵素の生産  (FK03030L)

タイトルに関連する用語 (6件)： Cordyceps ,  SN-1 ,  位置選択性 ,  リパーゼ ,  クローニング ,  蛋白質発現