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J-GLOBAL ID:201802244124251080   整理番号:18A0974535

接着性および非接着性GL261細胞の生細胞カルシウムイメージングは薬物応答における表現型依存性差異を明らかにする【JST・京大機械翻訳】

Live-cell calcium imaging of adherent and non-adherent GL261 cells reveals phenotype-dependent differences in drug responses
著者 (2件):
資料名:
巻: 17  号:ページ: 516  発行年: 2017年 
JST資料番号: U7305A  ISSN: 1471-2407  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: イギリス (GBR)  言語: 英語 (EN)
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【背景】腫瘍由来のGL261細胞株は,グリア芽細胞腫および他の高悪性神経膠腫を研究するためのモデルとして使用され,神経球として知られている遊離浮遊凝集体として,接着的に培養することができる。これらの異なる培養条件は,神経球培養細胞により生じる腫瘍形成性の増加により,異なる表現型を生じる。GL261病原性を理解するための重要な技術は細胞内カルシウムの生細胞蛍光イメージングである。しかしながら,GL261神経球の生細胞イメージングは,薬剤が細胞外媒体に添加される実験操作が,分析中に移動する細胞を生じるので,技術的な挑戦を示す。ここでは,蛍光カルシウムセンサフラ-2を用いたカルシウムイメージングのために,低融点アガロースでGL261神経球を固定化する方法を示した。【方法】GL261細胞をNCI-Frederick癌研究腫瘍研究所から得て,接着細胞として培養し,線維芽細胞成長因子2,上皮成長因子,およびB-27サプリメントを含む無血清培地に新たにトリプシン化した細胞を置くことによって神経球を形成した。実験の前に,接着細胞をフラ-2で負荷し,8ウェルチャンバースライド上で培養した。非付着神経球は,最初に,8穴のチャンバースライド上に液滴に置かれたフラ-2で負荷され,最終的に,細胞を固定化するために,低融点アガロースの薄層で覆われた。レシオメトリック偽着色画像を,ATP,カプサイシン,または車両制御による処理の間に得た。蛍光レベルがベースラインより30%以上増加した場合,細胞は応答性として顕著であった。治療群間の差をStudentのt検定と一方向ANOVAを用いて試験した。【結果】薬理学的処理に対する細胞応答は細胞表現型に基づいて異なることがわかった。接着細胞と神経球は共に細胞内カルシウムの上昇によりATPに応答した。特に,カプサイシン処理は,GL261神経球において強固な応答をもたらしたが,接着細胞では誘導しなかった。結論:急性トリプシン化細胞と原発腫瘍細胞を含む懸濁液で培養された任意の細胞型に広く適用できる方法,GL261細胞を固定化するための低融点アガロースの使用を示した。結果は,実験化合物に対する生理学的応答に関するデータを解釈するとき,GL261表現型(接着または神経球)を考慮することが重要であることを示す。Copyright 2018 The Author(s). All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (4件):
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JSTが定めた文献の分類名称とコードです
細胞生理一般  ,  腫ようの化学・生化学・病理学  ,  神経系の腫よう  ,  遺伝子発現 
引用文献 (32件):
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