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J-GLOBAL ID：201802246422221368   整理番号：18A1753721

LC3真核細胞発現ベクターの構築及び293T細胞におけるオートファジー誘導研究【JST・京大機械翻訳】

Study on Construction of LC3 Eukaryotic Expression Vector and Its Autophagy Induction in 293T Cells

著者 (5件)： You Jin (广西大学生命科学与技術学院,广西南寧,530005) ,  Li You (广西大学生命科学与技術学院,广西南寧,530005) ,  Shi Jie (广西大学生命科学与技術学院,广西南寧,530005) ,  Lu Jie (广西大学生命科学与技術学院,广西南寧,530005) ,  Lu Chunhua (广西大学生命科学与技術学院,广西南寧,530005)
資料名： Guangxi Kexue  (Guangxi Kexue)
巻： 25  号： 3  ページ： 313-317,324  発行年： 2018年 
JST資料番号： C3211A  ISSN： 1005-9164  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： [目的]pEGFP-N1-LC3真核細胞発現ベクターを構築し、それをヒト胚腎細胞293Tにトランスフェクションし、Earle’s塩平衡液(Bal-ancedsaltsolution)により、その細胞の中へトランスフェクションする。細胞の自己貪食は,EBSSによって誘発した。【方法】RT-PCRによりLC3遺伝子を増幅し,pEGFP-N1真核細胞発現ベクターに挿入し,組換えプラスミドを構築した。組み換えプラスミドをヒト胚腎臓細胞293Tにトランスフェクションし、顕微鏡観察、WesternblotでGFP-LC3融合タンパクの発現状況を測定した。トランスフェクション細胞をEarle’s塩平衡液飢餓で誘導し、Westernblotにより自食指標を検証し、レーザー共焦点顕微鏡で自己貪食形成を観察した。[結果]pEGFP-N1-LC3真核細胞発現ベクターの構築に成功し、293T細胞中に目的タンパク質を発現させ、Earle’s塩平衡液飢餓誘導後、自食胞の形成を観察することができた。LC3-IのLC3-IIへの変換は,ウエスタンブロットによって検出した。[結論]本実験は,癌細胞の病理学的進行における自食作用のメカニズムを研究するための実験材料を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： トランスフェクション ,  融合タンパク質 ,  ウェスタンブロット法 ,  *オートファジー ,  遺伝子 ,  腫瘍細胞 ,  *真核細胞 ,  RT-PCR法 ,  ヒト ,  顕微鏡観察
準シソーラス用語： LC3-II ,  オートファゴソーム ,  *293T細胞 ,  *発現ベクター ,  *LC3 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： LC3 ,  autophagy ,  green fluorescent protein ,  human embryonic kidney 293T cells

分類 (3件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  細胞生理一般  (EF02010S) ,  腫ようの化学・生化学・病理学  (GE02030N)

タイトルに関連する用語 (8件)： LC3 ,  真核細胞 ,  発現ベクター ,  構築 ,  293T細胞 ,  オートファジー ,  誘導 ,  研究