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J-GLOBAL ID：201802248461864492   整理番号：18A0967195

オキシトシン受容体およびTGF-β/PSmad3に対するウイルス感染の予想外の進化的に保存された迅速効果【JST・京大機械翻訳】

Unexpected evolutionarily conserved rapid effects of viral infection on oxytocin receptor and TGF-β/pSmad3

著者 (2件)： Liu Yutong (Department of Bioengineering and QB3 Institute, Univerisity of California, Berkeley, Berkeley, USA) ,  Conboy Irina (Department of Bioengineering and QB3 Institute, Univerisity of California, Berkeley, Berkeley, USA)
資料名： Skeletal Muscle (Web)  (Skeletal Muscle (Web))
巻： 7  号： 1  ページ： 7  発行年： 2017年 
JST資料番号： U7051A  ISSN： 2044-5040  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 【背景】shRNAレンチウイルスベクターは哺乳類細胞における遺伝子ノックダウンに広く使用されており,非標的shRNAは典型的にRNAiにより引き起こされる一般的変化に対する適切な実験的制御と考えられている。しかし,細胞シグナル伝達経路の調節に対する非標的レンチウイルス制御の影響はほとんど知られていない。本研究では,マウスおよびヒト骨格筋細胞におけるERK/MAPK経路を介したオキシトシン受容体(OXTR)発現に対する対照レンチウイルス形質導入の影響を,筋原性活性およびマウス筋肉再生におけるin vivoで評価した。さらに,ヒト集団におけるOXTRレベルに対するウイルス感染の影響についての公表データを示し,関連のないウイルス病理学が共通の結果を有することを見出した:OXTRのレベルの低下。【方法】著者らは,リアルタイムRT-PCRおよびウェスタンブロット法を通して,制御およびSmad3標的ウイルスベクターによる形質導入におけるOXTR mRNA発現の変化を調べ,免疫蛍光法により確認した。Smad3およびOXTR発現の変化を,マウスおよびヒト筋芽細胞を用いたin vitroおよびマウス衛星細胞におけるin vivoの両方で検討した。ヒトにおけるOXTRダウンレギュレーションに対するウイルス感染の一般的影響も,公表された遺伝子発現オムニバス(GEO)データセットを分析することにより調べた。ウイルス形質導入(Pax7+Ki67+細胞の割合)により生じた筋芽細胞筋原性活性の変化を免疫蛍光法により調べた。【結果】本研究で示した結果は,レンチウイルス制御ベクターがmRNAおよび蛋白質レベルでOXTR発現を有意に下方制御し,OXTR,ERKシグナル伝達の重要な下流エフェクターを減少させ,感染細胞の筋原性増殖を減少させることを確立した。この効果はマウスとヒト筋原細胞の間で進化的に保存されており,in vivoでのマウスのレンチウイルス形質導入後の衛星細胞で発現する。さらに,公表されたデータセットの検査により,異なるウイルス感染を伴うヒトにおいて同様のOXTRダウンレギュレーションが明らかになった。さらに,Smad3標的shRNAで形質導入した細胞は,対照ウイルスで形質導入した細胞よりもOXTRを下方制御した。結論:本研究は,対照ウイルスで形質導入された実験的コホートが非形質導入細胞および動物と同じではない可能性があることを示唆する。特に,制御ウイルスベクターはOXTR/ERKのような重要な細胞シグナル伝達経路の強度を有意に変化させる。これらの結果は,レンチウイルス形質導入が筋原性増殖を有意に減少させ,一般的にウイルス感染が筋肉の健康と再生の減少,代謝健康の低下,および効果的なOXTRシグナル伝達に依存することを示唆する。さらに,著者らのデータはTGF-β/pSmad3とOXTRの間の経路クロストークを示唆し,TGF-β/pSmad3経路の持続的減衰がプロ再生OXTR/pERKシグナル伝達を減少させることを意味する。Copyright 2018 The Author(s). All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 遺伝子発現 ,  蛍光抗体法 ,  in vitro実験 ,  ウェスタンブロット法 ,  ダウンレギュレーション ,  mRNA ,  RNA干渉 ,  レンチウイルス ,  *ウイルス ,  形質導入 ,  *TGFβ ,  ヒト ,  筋芽細胞 ,  ベクター
準シソーラス用語： ウイルスベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (8件)： オキシトシン受容体 ,  ウイルスベクター ,  ウイルス感染症 ,  RNAi ,  Smad ,  TGF-β ,  ERK ,  筋再生

分類 (4件)： 個生態学  (EE03020H) ,  遺伝子操作  (EC02050B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  細胞膜の受容体  (EF04030C)

引用文献 (48件)：

• RNA; Lentivirus-delivered stable gene silencing by RNAi in primary cells; S STEWART; 9; 2003; 493-501; 10.1261/rna.2192803; CR1;
• Science; Notch signaling: cell fate control and signal integration in development; S Artavanis-Tsakonas; 284; 1999; 770-776; 10.1126/science.284.5415.770; CR2;
• Cell Stem Cell; A temporal switch from notch to Wnt signaling in muscle stem cells is necessary for normal adult myogenesis; A Brack, I Conboy, M Conboy, J Shen, T Rando; 2; 2008; 50-59; 10.1016/j.stem.2007.10.006; CR3;
• Neural Dev; Neural tube derived Wnt signals cooperate with FGF signaling in the formation and differentiation of the trigeminal placodes; C Canning, L Lee, S Luo, A Graham, C Jones; 3; 2008; 35; 10.1186/1749-8104-3-35; CR4;
• Aging Cell; Relative roles of TGF-Î21 and Wnt in the systemic regulation and aging of satellite cell responses; M Carlson, M Conboy, M Hsu, L Barchas, J Jeong, A Agrawal, A Mikels, S Agrawal, D Schaffer, I Conboy; 8; 2009; 676-689; 10.1111/j.1474-9726.2009.00517.x; CR5;

タイトルに関連する用語 (6件)： オキシトシン受容体 ,  TGF-β ,  ウイルス感染 ,  予想 ,  進化 ,  保存