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J-GLOBAL ID:201802249858762868   整理番号:18A1858890

化学酵素標識による包括的5-ヒドロキシメチルシトシンの高感度定量化【JST・京大機械翻訳】

Hypersensitive quantification of global 5-hydroxymethylcytosine by chemoenzymatic tagging
著者 (6件):
資料名:
巻: 1038  ページ: 87-96  発行年: 2018年 
JST資料番号: A0394A  ISSN: 0003-2670  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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5-ヒドロキシメチルシトシン(5hmC)は後成的DNA修飾である。全体的な5hmCレベルの組織特異的減少は様々なタイプの癌と関連している。5hmCレベルの検出に関連する課題の1つは,特に血液中の非常に低い含有量である。信頼できるグローバル5hmC定量のための金標準は,多重反応モニタリング(MRM)モードで操作する液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析(LC-MS/MS)である。LC-MS/MSによる5hmC検出に関連する困難さは,その低存在量,低イオン化効率,及び共溶出化合物からの可能なイオン抑制を含む。したがって,白血病および他の血液悪性腫瘍の診断のための血液サンプル中の5hmCレベルの検出は,ユニークな挑戦を提示する。これらの困難を克服するために,5hmCを特異的に標識するための簡単な化学酵素法を導入し,検出感度の8倍の増加をもたらした。健常人と白血病患者の血液試料を含む種々のヒト組織中の5hmCレベルを,最も基本的な四重極質量分析装置と200ngのDNAのみを用いて定量的に検出できることを示した。本法の検出限界(LOD)は,300ng DNAから0.001%5hmCであり,白血病のような低い5hmCレベルに関連する疾患の将来の質量分析に基づく診断に十分である。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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有機化合物の各種分析 
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