抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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ギ酸デヒドロゲナーゼH(FDH-H)および[NiFe]-ヒドロゲナーゼ3(Hyd-3)は,水素生産ホルマート水素リアーゼ(FHL)錯体の触媒成分を形成し,腸内細菌における混合酸発酵中にギ酸をH_2およびCO_2に不均化する。FHLは最小7蛋白質から成り,この複合体がどのように集合するかについてはほとんど理解されていない。初期研究により,FHL複合体へのFDH-H集合に関与するフェレドキシン様蛋白質,HydNが同定された。FDH-Hとその小サブユニットHycBは,FHL複合体に結合するフェレドキシン様蛋白質で,FHL複合体の安定性と集合におけるHydNとそのパラログ,YsaAの役割を調べた。hycB遺伝子の欠失は,酸化還元染料仲介FDH-H活性を約10%低下させ,FHL依存性H_2産生を消失させ,Hyd-3活性を低下させた。これらのデータはFHL複合体の必須電子移動成分であるHycBと一致した。hydNとysaA欠失株のFDH-H活性は親の59%と57%に減少したが,二重欠失はFDH-Hの活性を28%に低下させ,hycBによる三重欠失を1%に減少させた。著しく,hycB欠失とは対照的に,HydNとYsaAの不在は,FHL依存性H_2産生または総Hyd-3活性に有意な影響を及ぼさなかった。FDH-H蛋白質レベルも変化しなかった。これはE.coli ysaA欠失株に対する表現型の最初の記述であり,最適酸化還元染料結合FDH-H活性に必要な新規因子として同定された。ysaA欠失株は,hydNとysaAによってFDH-H活性のために補完することができた。しかし,hydN欠失株は補完することができなかった。これらのプラスミドの導入は,H_2生産に影響しなかった。細菌ツーハイブリッド相互作用により,YsaA,HydN及びHycBは互いに相互作用し,FDH-H蛋白質と相互作用することを示した。大腸菌における10フェレドキシン様蛋白質の更なる新規嫌気性交差相互作用も発見し,記述した。これらのデータは,レドックス染料ベンジルビオロゲンで測定されたFDH-H活性が3つの独立した小サブユニットと相互作用するFDH-H蛋白質の和であることを示し,FDH-Hが嫌気性細胞で異なる酸化還元蛋白質複合体と会合してギ酸酸化から電子を供給することを示唆した。Copyright 2018 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】