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J-GLOBAL ID：201802256958499929   整理番号：18A0512944

Gluconobacter oxydansからの膜結合キノン蛋白質キナ酸デヒドロゲナーゼの異種間発現の増強【Powered by NICT】

Improved heterologous expression of the membrane-bound quinoprotein quinate dehydrogenase from Gluconobacter oxydans

著者 (14件)： Yakushi Toshiharu (Graduate School of Science and Technology for Innovation, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Yakushi Toshiharu (Department of Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Yakushi Toshiharu (Research Center of Thermotolerant Microbial Resources, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Komatsu Kazutaka (Department of Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Matsutani Minenosuke (Graduate School of Science and Technology for Innovation, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Kataoka Naoya (Graduate School of Science and Technology for Innovation, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Kataoka Naoya (Department of Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Kataoka Naoya (Research Center of Thermotolerant Microbial Resources, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Vangnai Alisa S. (Biocatalyst and Environmental Biotechnology Research Unit, Department of Biochemistry, Faculty of Science, Chulalongkorn University, Bangkok 10330 Thailand) ,  Toyama Hirohide (Department of Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Adachi Osao (Graduate School of Science and Technology for Innovation, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Matsushita Kazunobu (Graduate School of Science and Technology for Innovation, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Matsushita Kazunobu (Department of Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan) ,  Matsushita Kazunobu (Research Center of Thermotolerant Microbial Resources, Yamaguchi University, Yamaguchi 753-8515, Japan)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 145  ページ： 100-107  発行年： 2018年 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Gluconobacter oxydansはキナ酸デヒドロゲナーゼ(QDH),膜結合ピロロキノリンキノン(PQQ)依存性デヒドロゲナーゼにより触媒される反応によるキナ酸の酸化による3-デヒドロキナ酸を生成した。我々は以前,QDHのヌクレオチドおよび推定アミノ酸配列を報告し,Pseudomonassp.(A.S.におけるQDHの異種発現系を構築したVangnai,W Promden,W.De Eknamkul,K.松下,H.富山,生化学(モスクワ)75:452 459,2010)。この研究を通じて,著者らはQDHの配列を更新し,広宿主域プラスミドを用いたGluconobacter株におけるQDHの異種発現を改善することを目指す。長い5′UTRを含むプラスミドを用いたQDHの発現は短い5′UTRを持つプラスミドを用いたものより高かった。さらに,Gluconobacterの膜結合アルコールデヒドロゲナーゼ(ADH)の推定プロモーター領域の使用は,lacZプロモーターの使用と比較して,より高い発現レベルをもたらした。塩基置換実験は二つの可能性間の正しいTTG開始コドンの同定を可能にした,これらの実験の結果は,発現したQDHのN末端アミノ酸配列と一致した。しかし,ATGからTTGコドンの変化はQDH発現を増加させなかった。QDH発現のための最適プラスミドは長い5′-UTRとADHプロモータと構造遺伝子を含んでいた。組換えGluconobacter株の細胞膜には,野生型株で観察されたものより約10倍高い比QDH活性を示した。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】

シソーラス用語： 細胞膜 ,  プロモーター領域 ,  アルコールデヒドロゲナーゼ ,  アミノ酸配列 ,  野生型 ,  *キノン ,  *デヒドロゲナーゼ ,  構造遺伝子 ,  *Gluconobacter ,  プラスミド ,  塩基対置換 ,  カルボン酸 ,  脂環式アルコール ,  第二アルコール ,  ヒドロキシ酸 ,  ポリオール
準シソーラス用語： 異種発現 ,  *膜結合 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 酢酸菌 ,  キナ酸 ,  ピロロキノリンキノン ,  膜蛋白質 ,  デヒドロゲナーゼ

分類 (3件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

物質索引 (1件)： キナ酸

タイトルに関連する用語 (8件)： Gluconobacter ,  膜結合 ,  キノン ,  蛋白質 ,  キナ酸 ,  デヒドロゲナーゼ ,  発現 ,  増強