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J-GLOBAL ID:201802260948181267   整理番号:18A0569164

Escherichia coli中のイソプレノイドの工業生産に向けて:染色体に組み込まれたメバロン酸経路のCRISPR-Cas9に基づく最適化から学んだ教訓【Powered by NICT】

Toward industrial production of isoprenoids in Escherichia coli: Lessons learned from CRISPR-Cas9 based optimization of a chromosomally integrated mevalonate pathway
著者 (24件):
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巻: 115  号:ページ: 1000-1013  発行年: 2018年 
JST資料番号: D0019A  ISSN: 0006-3592  CODEN: BIBIAU  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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Escherichia coliは工学天然及び異種経路により異なる化学物質の生産のための選択の生物であった。本研究では,同時にイソプレノイドのための産業基盤としてのE.coliに関連する主要な問題のいくつかを,スクロースで増殖できないこと,毒性メバロン酸(MVA)経路中間体上での内因性制御の欠如,および制限され経路工学染色体へを含んでいた。概念の証明として,著者らは染色体への及びストレス応答制御下で異種MVA経路を発現することによりcscAKBオペロンを統合することにより,スクロースからイソプレノイドビサボレンを生産することができる大腸菌DH1株を作成した。全経路は染色体に組み込まれた場合には生産レベルはプラスミド発現と比較して劇的に低下した。染色体に組込まれたMVA経路を最適化するために,プロモーター配列に代わる迅速かつ体系的にCRISPR-Cas9系を確立した。この戦略は,高い経路発現とビサボレン生産の5倍の改善をもたらした。より興味深いことに,著者らは染色体組込経路の代謝工学に関連するいくつかの課題を理解し,対処するためにプロテオミクスデータセットを解析した。プラスミド最適化オペロンを統合するゲノムに最適運転は簡単な仕事ではなく,染色体に貧弱な工学選択は細胞死よりむしろ低力価の結果につながる可能性があることを示した。これらの結果に基づいて,著者らはまた染色体代謝工学のための方向を提案した。Copyright 2018 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (1件):
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遺伝子操作 

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