抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】肺非小細胞癌A549細胞の放射線感受性に及ぼすサイレンス調節蛋白質6(SIRT6)の効果を調査する。【方法】SIRT6を発現するアデノウイルスベクターAd-SIRT6を構築した。リアルタイム定量的PCR(QPCR)を用いて,異なるトランスフェクション強度(0,25,50,100,200pfu/細胞)で24時間のAd-SIRT6トランスフェクション後のSIRT6mRNAレベルを検出した。実験群は,対照群,空ベクター(Ad-null)群,および過剰発現(Ad-SIRT6)群に分けた。Ad-null群とAd-SIRT6群のウイルス濃度は200pfu/細胞であった。0,2,4,6,8および10GyのX線照射後の3群の生存スコア(SF)を,クローン形成実験により検出した。細胞生存曲線をマルチターゲットクリックモデルによって描き,増感比(SER)を計算した。3群の細胞周期とアポトーシスを,フローサイトメトリーによって検出した。48時間の4GyX線照射後,ピルビン酸キナーゼ2(PKM2),乳酸デヒドロゲナーゼA(LDHA)およびヘキソキナーゼ(HK)の発現レベルを,QPCRにより検出した。【結果】QPCRは,A549細胞のSIRT6mRNAレベルが,25200pfu/細胞の範囲で,トランスフェクション強度の増加に伴い増加したことを示した(P<0.05)。001,0,25,50,100,200pfu/細胞のSIRT6mRNAレベルは,それぞれ1.012±0.016,1.356±0.185,2であった。243±0.695,4.887±1.169,7.241±1.425;50,100,200pfu/細胞のSIRT6mRNAレベルは,対照群より有意に高かった(P<0.05)。200pfu/細胞のトランスフェクションは,クローン形成実験の後,最も強力であった。Ad-null群と対照群のSFは,0,2,4,6,8,10Gyの放射線照射の後,有意差を示さなかった(P>0.05)。Ad-SIRT6群のSFは,Ad-null群および対照群に比して低かった(P<0.05)。【結果】細胞生存曲線は,対照群およびAd-null群と比較して,Ad-SIRT6群のGo/G1期細胞の割合およびアポトーシス率が増加した。S期細胞の割合とPKM2、LDHAとHKmRNAのレベルは平均的に低下し、統計学的有意差があった(P<0.05)。Ad-SIRT6群の12,24,36,48時間のグルコース消費は,対照群とAd-null群より低かった(P<0.05)。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】