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J-GLOBAL ID：201802265181938601   整理番号：18A1732364

CaM変異体プラスミドの構築,発現精製および活性同定【JST・京大機械翻訳】

Construction of a Mutant CaM-expressing Plasmid,and Expression,Purification,and Activity Identification of the Recombinant Protein

著者 (10件)： Su Jingyang (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Wang Rongrong (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Yuan Yuan (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Li Songlin (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Zhu Zhengnan (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Huang Luting (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Feng Rui (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Shao Dongxue (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Sun Xuefei (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122) ,  Hao Liying (中国医科大学薬学院薬物毒理学教研室,沈陽,110122)
資料名： Zhongguo Yike Daxue Xuebao  (Zhongguo Yike Daxue Xuebao)
巻： 47  号： 2  ページ： 97-101  発行年： 2018年 
JST資料番号： C3096A  ISSN： 0258-4646  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】カルモジュリン(CaM)変異体CaME141Gの融合蛋白質を,発現,精製,および活性同定のために調製する。【方法】野生型CaMの141のアミノ酸E(GAG)をG(GGG)に変異させ,次に,組換えプラスミドを大腸菌BL21に形質転換し,GST融合蛋白質を大量に培養し,GS-4Bbeadsを精製した。PreScissionproteaseはGSTタグを消化し、Bradford法で精製後タンパク濃度を測定し、SDS-PAGEゲル電気泳動でCaME141Gタンパク質の相対分子量と純度を測定した。pull-down実験により,精製蛋白質の生物活性を確認した。結果:精製後のCaME141Gタンパク質は比較的高い濃度と純度を持ち、しかも心筋CaV1とすることができる。2カルシウムチャンネルC末端のPreIQタンパク質断片は結合し、CaME141Gタンパク質濃度依存性があり、このタンパク質は心筋CaV1とあることが示唆された。2カルシウムチャンネル結合の能力。【結語】CaME141G融合蛋白質を成功裏に構築し,CaME141G蛋白質を得て,CaM変異体のCaV1を,CaM突然変異体のCaM突然変異体を徹底的に研究するために,本研究の結果,CaME141Gタンパク質を入手するのに成功したので,CaME141Gタンパク質は,CaME141Gタンパク質を精製するのに成功した。2カルシウムチャンネルにおける調節作用と心臓血管疾患との関係に基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： カルモジュリン ,  融合タンパク質 ,  心筋 ,  純度 ,  野生型 ,  形質転換 ,  カルシウムチャンネル ,  ゲル電気泳動 ,  濃度依存性 ,  大腸菌 ,  *カルシウム ,  生物活性 ,  *プラスミド ,  SDS-PAGE ,  タンパク質

著者キーワード (5件)： calmodulin ,  mutant ,  plasmid ,  expression and purification ,  pull-down assay

分類 (2件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

タイトルに関連する用語 (8件)： CAM ,  変異体 ,  プラスミド ,  構築 ,  発現 ,  精製 ,  活性 ,  同定