抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】LNA-taqmanプローブに基づくリアルタイム蛍光PCR法を用いて,ワルファリンの用量依存性遺伝子型ビタミンK1-CYP4F2を検出する。ビタミンK酸化物還元酵素複合体サブユニット1(VKORC1)とシトクロムP4502C9(CYP2C9)の方法を検討した。方法 CYP4F2-1347C>T,CYP2C9*3,VKORC1-1173C>TとVKORC1-1639G>Aの4つの一塩基多型(SNP)遺伝子座に対して,対立遺伝子特異性プローブとプライマーを設計した。また,LNA-taqmanプローブの特異性を評価した。150例のワルファリン治療を受けた患者の末梢血サンプルのゲノムDNAを検出し、同時に一部のリアルタイム蛍光PCR産物サンプルに対して検証を行った。結果:(1)LNA-taqmanプローブの検出方法は特異性が高く、交差性がなかった。(2)150例の患者のうち,CYP4F2-1347C>T遺伝子型CC,CTおよびTTはそれぞれ87,56および7例で,それぞれ58%,37.3%および4.7%を占めた。CYP2C9*3遺伝子型*1/*1と*1/*3はそれぞれ142と8例があり、それぞれ94.7%と5.3%を占め、ホモ接合体*3/*3遺伝子型は検出されなかった。VKORC1-1173C>T遺伝子型TT、TCとCCはそれぞれ127、20と3例で、それぞれ84.7%、13.3%と2%を占めた;VKORC1-1639G>A遺伝子型AA,AGとGGはそれぞれ124,23と3例で,それぞれ82.7%,15.3%と2%を占めた。結論:LNA-taqmanプローブに基づくリアルタイム蛍光PCR法は操作が簡便で、価格が安く、結果が正確で信頼できるなどの特徴を有し、臨床実験室でCYP4F2、CYP2C9*3、VKORC1の遺伝子タイピングに適する。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】