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J-GLOBAL ID：201802266418913071   整理番号：18A1650880

Bombyx mori核多角体ウイルスBACMID発現系を用いたカイコで発現したヒトパピローマウイルス様粒子の精製【JST・京大機械翻訳】

Purification of human papillomavirus-like particles expressed in silkworm using a Bombyx mori nucleopolyhedrovirus bacmid expression system

著者 (11件)： Minkner Robert (Department of Bioscience, Graduate School of Science and Technology, Shizuoka University, 836 Ohya, Suruga-ku, Shizuoka 422-8529, Japan) ,  Baba Rina (Department of Applied Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Shizuoka University, 836 Ohya, Shizuoka 422-8529, Japan) ,  Kurosawa Yae (R&D Department, Hoya Technosurgical Co., 1-1-11, Tsutsujigaoka, Akishima-shi, Tokyo 196-0012, Japan) ,  Suzuki Shinichiro (Department of Applied Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Shizuoka University, 836 Ohya, Shizuoka 422-8529, Japan) ,  Kato Tatsuya (Department of Bioscience, Graduate School of Science and Technology, Shizuoka University, 836 Ohya, Suruga-ku, Shizuoka 422-8529, Japan) ,  Kato Tatsuya (Department of Applied Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Shizuoka University, 836 Ohya, Shizuoka 422-8529, Japan) ,  Kato Tatsuya (Laboratory of Biotechnology, Green Chemistry Research Division, Research Institute of Green Science and Technology, Shizuoka University, 836 Ohya Suruga-ku, Shizuoka 422-8529, Japan) ,  Kobayashi Shintaro (R&D Department, Hoya Technosurgical Co., 1-1-11, Tsutsujigaoka, Akishima-shi, Tokyo 196-0012, Japan) ,  Park Enoch Y. (Department of Bioscience, Graduate School of Science and Technology, Shizuoka University, 836 Ohya, Suruga-ku, Shizuoka 422-8529, Japan) ,  Park Enoch Y. (Department of Applied Biological Chemistry, Faculty of Agriculture, Shizuoka University, 836 Ohya, Shizuoka 422-8529, Japan) ,  Park Enoch Y. (Laboratory of Biotechnology, Green Chemistry Research Division, Research Institute of Green Science and Technology, Shizuoka University, 836 Ohya Suruga-ku, Shizuoka 422-8529, Japan)
資料名： Journal of Chromatography B  (Journal of Chromatography B)
巻： 1096  ページ： 39-47  発行年： 2018年 
JST資料番号： W0571A  ISSN： 1570-0232  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： カイコに基づくBombyx moriの核多角体ウイルスのbacmid発現系からのヒトパピローマウイルス様粒子(HPV-LPs)の精製のための3段階クロマトグラフィープロトコルを開発した。宿主細胞DNA分離のために,陰イオン交換クロマトグラフィーを適切な固定相のスクリーニング後に用いた。カチオン交換クロマトグラフィーの2つの分離原理と第2段階としてのセラミックヒドロキシアパタイト(CHT)の金属親和性を用いて,試料中のバキュロウイルスの量はqPCRの検出限界以下に減少した。CHT分離を用いた溶出緩衝液に関して最適化した。150~600mMのリン酸ナトリウム,pH7.2は,HPV-LPの最も高い回収率をもたらした。ヘパリンクロマトグラフィーを用いて,試料容積を減少させ,汚染蛋白質の分離中に標的蛋白質を高度に濃縮することができた。第2の精製段階では,DNAの99.3%以上が除去され,感染性バキュロウイルスは残存しなかった。ヘパリンカラムクロマトグラフィーによる濃縮後,DNAと蛋白質の99.9%以上が除去された。この方法により達成された純度はDDDDKタグに基づくアフィニティークロマトグラフィーとショ糖勾配超遠心分離により得られた純度よりも高く,比較精製法として使用された。ここで記述されたカイコ脂肪体からのHPV-LPの3段階精製は証明概念であり,拡張可能な方法であるが,全体収率は改善されないままである。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： ヘパリン ,  最適化 ,  DNA【核酸】 ,  イオン交換クロマトグラフィー ,  純度 ,  回収率 ,  親和性 ,  検出限界 ,  クロマトグラフィー ,  バキュロウイルス科 ,  タンパク質 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  スクリーニング ,  *カイコガ ,  *ウイルス様粒子 ,  血液作用薬 ,  抗凝固薬 ,  薬物 ,  グリコシド ,  ポリウロニド ,  グルコシド ,  糖硫酸 ,  血液・体液作用薬 ,  改変 ,  微生物 ,  化学分析 ,  解析 ,  分析 ,  生化学的分析 ,  *ガ ,  *カイコガ科 ,  *無脊椎動物

著者キーワード (6件)： ウイルス様粒子 ,  カイコ ,  BMNPV BACMID ,  精製 ,  イオン交換クロマトグラフィー ,  ヒトパピローマウイルス

分類 (1件)： クロマトグラフィー,電気泳動  (CC01050S)

タイトルに関連する用語 (7件)： 核多角体ウイルス ,  発現 ,  カイコ ,  ヒト ,  パピローマ ,  ウイルス様粒子 ,  精製