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J-GLOBAL ID：201802268424874869   整理番号：18A1082672

ヒトmicroRNA149は,レンチウイルスベクターの構築とメラノーマ細胞の増殖と移動に及ぼす抑制効果を示した。【JST・京大機械翻訳】

Construction of miR-149 suppression lentivirus vector and effect of low miR-149 expression on proliferation and migration of melanoma cells

著者 (5件)： Wang Peipei (安徽医科大学第二附属医院腫瘤科,合肥,230601) ,  Wang Daoyue (安徽医科大学第二附属医院腫瘤科,合肥,230601) ,  Xuan Han (安徽医科大学第二附属医院腫瘤科,合肥,230601) ,  Chen Zhendong (安徽医科大学第二附属医院腫瘤科,合肥,230601) ,  Mou Lin (安徽医科大学第二附属医院腫瘤科,合肥230601;安徽医科大学第二附属医院科研部,合肥230601)
資料名： Anhui Yike Daxue Xuebao  (Anhui Yike Daxue Xuebao)
巻： 52  号： 12  ページ： 1756-1763  発行年： 2017年 
JST資料番号： C3527A  ISSN： 1000-1492  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】ヒトmicroRNA149(Hsa-miR-149)のレンチウイルスベクターを造る。方法:miRBaseとNCBIデータベースからmiR-149配列を得て,そのプライマー配列を設計し,アニーリング反応により二本鎖DNAオリゴヌクレオチド断片を得た。ベクターpBS-hU6-1と連結し、連結後のベクターをFG12と連結し、シークエンシングにより同定した後、組換えレンチウイルスベクターを得た。組換えレンチウイルスプラスミドを293T細胞に共形質移入し,ウイルス力価をパッケージし,ウイルス力価を測定し,次に,パッケージしたウイルスでMel-RM細胞を感染させた。細胞増殖と遊走能をMTT法と細胞移動アッセイにより検出し,miR-149発現の抑制に成功したレンチウイルスベクターを成功裏に構築し,挿入された遺伝子の配列が正しいことを確認した。蛍光顕微鏡下で、トランスフェクション後の297T細胞に大量の緑色蛍光タンパク質を発現させ、ウイルスを収集し、勾配滴定法で測定した組換えベクターウィルス力価は3.2×1010TU/Lであった。miR-149の発現レベル(P<0.05)は,ウイルス感染のMel-RM細胞によって効果的に下方制御された(P<0.05)が,それは,感染した無負荷のFG12ウイルスの対照群のそれらと比較して,かなり減少した(P<0.05)。感染抑制miR-149発現組み換えプラスミドの実験群における生細胞数は明らかに減少した(P<0.05)。細胞遊走実験の結果は,実験群が,対照群と比べて,Mel-RM細胞の移動を有意に阻害することを示した(P<0.001)。【結語】miR-149発現を阻害するレンチウイルスベクターの構築に成功し,miR-149発現の抑制は,Mel-RM細胞の増殖と移動を阻害する。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 細胞増殖 ,  データベース ,  オリゴヌクレオチド ,  細胞移動 ,  遺伝子 ,  *ウイルス ,  *ヒト ,  *ベクター ,  蛍光顕微鏡 ,  ウイルス感染 ,  トランスフェクション ,  ダウンレギュレーション
準シソーラス用語： 生細胞 ,  293T細胞 ,  *レンチウイルスベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： miR-149 ,  lentivirus vector ,  proliferation ,  migration ,  melanoma cell

分類 (4件)： ウイルス学一般  (EG04010J) ,  抗ウイルス薬の基礎研究  (GW17040O) ,  遺伝子操作  (EC02050B) ,  遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (6件)： ヒト ,  レンチウイルスベクター ,  構築 ,  メラノーマ細胞 ,  増殖 ,  抑制効果