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J-GLOBAL ID:201802269948476146   整理番号:18A1451543

Act12遺伝子形質転換システムの確立と最適化【JST・京大機械翻訳】

Establishment and Optimization of Genetic Transfemation System for Streptomyces pactum Act12
著者 (7件):
資料名:
巻: 27  号:ページ: 418-425  発行年: 2018年 
JST資料番号: C2199A  ISSN: 1004-1389  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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Streptomycespactum(Streptomycespactum)Act12は黄土高原から単離された1株の多効性放線菌であり、良好な生防応用価値があり、研究と利用を深めるため、利用が進んでいる。この菌株の高効率遺伝形質転換システムを確立する必要がある。本試験は統合型プラスミドpSET152を出発プラスミドとし、大腸菌S17-1をドナーとし、Act12の胞子を受容体として、改良2CMY培地上で接合転移を行った。胞子発芽の最適条件は50°C,10分の熱刺激,10.0mg/Lのアプラマイシン濃度,18時間の被覆時間,2.079×10-5の変換効率であった。プラスミドpSET152は,アプタマイシン遺伝子を標的とするPCRによってAct12に首尾よく形質転換された。同時に、この転化システムを利用して、Act12ゲノムの1つの可能な負の調節転写因子spa0520を成功的にノックアウトした。また、二次代謝スペクトルの明らかな変化の欠失変異株Aspa0520を得た。Act12の遺伝的形質転換系は,その生物活性機構の研究と開発利用の基礎を築いた。また、培地の改良により、Act12は窒素源がNO3-を含む時、胞子が豊富で、後続の研究に構想を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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, 【Automatic Indexing@JST】
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遺伝子操作  ,  野菜  ,  細胞・組織培養法 
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