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J-GLOBAL ID:201802271064665781   整理番号:18A1039175

グルタチオントランスフェラーゼθ2活性のための高速液体クロマトグラフィーに基づくアッセイ:ヒト肝臓画分における個体間変動性の特性化への応用【JST・京大機械翻訳】

High-performance liquid chromatography-based assay for glutathione transferase theta 2 activity: Application to characterize interindividual variability in human liver fractions
著者 (5件):
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巻: 156  ページ: 181-188  発行年: 2018年 
JST資料番号: H0876A  ISSN: 0731-7085  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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ヒトグルタチオントランスフェラーゼT2-2(GSTT2-2)は,毒物および発癌物質の不活性化において役割を果たすと考えられる酵素の1つである。この酵素の発現レベルは遺伝的及び環境的因子により決定され,感受性の差異をもたらす可能性がある。GST2-2に対する特異的アッセイとして,硫酸メンチル(MSU)のGSH抱合に基づく分光分析を用いた。しかし,この吸光分析は20人のヒト肝臓試料のパネルにおけるGSTT2-2活性を正確に定量するにはあまりにも敏感ではないように見えた。より最近,生物学的試料におけるGSTT2-2の発現レベルはmRNAレベルの測定により定量化されている。mRNAレベルは酵素活性と必ずしも相関しないので,特異的で高感度なアッセイが必要である。本研究では,高感度高速液体クロマトグラフィー(HPLC)に基づく方法を開発した。新しい方法を適用することによって,最初に,MSUのGSH抱合を触媒することにおける15の組換えヒトGSTアイソフォームの間のGSTT2-2の特異性を確認した。さらに,GSTT2-2活性の65倍の個体間変異が個々の肝臓画分から見出された。個々の肝臓画分に本法を適用することにより,GSTT2-2活性の65倍の個体間変異が見出された。第二の応用として,環境発癌物質1-メチルピレン硫酸塩(MPS)のGSH抱合におけるGSTT2-2の役割をGSTT2-2触媒MSU共役との相関分析により研究した。比較的低い相関は,他のGSTが組換え型GSTとのインキュベーションにより確認されたように,MPS抱合にも寄与することを示唆した。Copyright 2018 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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