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J-GLOBAL ID：201802272765990342   整理番号：18A0647760

トリコトキシンC蛋白質のクローン発現と抗体調製【JST・京大機械翻訳】

Cloning and expression of toxin C gene of Clostridium difficile and its polyclonal antibody preparation

著者 (8件)： Wang Jianxia (河北大学生命科学学院,河北保定 071000;軍事医学科学院基礎医学研究所,北京 100850) ,  Wang Hongwei (河北大学生命科学学院,河北保定,071000) ,  Yang Xiqin (軍事医学科学院基礎医学研究所,北京,100850) ,  Huang Chen (浙江省疾病預防控制中心,浙江杭州,310051) ,  Luo Yun (浙江省疾病預防控制中心,浙江杭州,310051) ,  Jin Dazhi (浙江省疾病預防控制中心,浙江杭州,310051) ,  Feng Xiaoyan (軍事医学科学院基礎医学研究所,北京,100850) ,  Zhang Heqiu (軍事医学科学院基礎医学研究所,北京,100850)
資料名： Zhongguo Yaolixue yu Dulixue Zazhi  (Zhongguo Yaolixue yu Dulixue Zazhi)
巻： 31  号： 7  ページ： 760-765  発行年： 2017年 
JST資料番号： C2292A  ISSN： 1000-3002  CODEN： ZYYZEW  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:トリコトキシンC(tcdC)遺伝子をクローニングし、TcdCタンパク質の原核発現ベクターを構築し、ポリクローナル抗体を作製する。【方法】tcdC遺伝子の部分的断片を得て,原核生物発現ベクターにクローン化して,大腸菌に形質転換して,GST-cdcd/LとIL1-cdcd/L融合蛋白質を発現させるために,E.coli(大腸菌)に形質転換した。前者を免疫抗原とし、後者を抗原として用いた。融合蛋白質の発現をSDS-PAGEにより同定し,IL-1-TcdC/L融合蛋白質をNiカラムにより精製し,GST-TcdC/L融合蛋白質をQカラムにより精製した。精製したGST-TcdC/L融合タンパク質をウサギの背中皮内に多点注射し、1mg、4週間1回、3回に分けた。最後の1回の免疫の2週間後に、血清を採血し、血清を分離した。IL-1-TcdC/L蛋白質で被覆された酵素を用いて,ELISA法により抗血清力価を測定した。ウェスタンブロット法により,多特異性を検出した。結果:SDS-PAGEの結果は,2つの融合蛋白質が予想された分子量と一致し,TcdCポリクローナル抗体価が1以上であることを示した。6.4×104のウェスタンブロット法により,TcdC/Lポリクローナル抗体が特異的にTcdC蛋白質を同定することができることを示した。【結論】tcdC/L遺伝子をクローン化し,原核生物発現を成功裏にクローン化し,ポリクローナル抗体を成功裏に調製し,さらなる研究におけるtcdC遺伝子の役割と機序を研究するための基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 抗血清 ,  抗原 ,  ELISA ,  形質転換 ,  *抗体 ,  大腸菌 ,  ウェスタンブロット法 ,  分子量 ,  遺伝子 ,  融合タンパク質 ,  原核生物 ,  血清 ,  *クローン ,  ポリクローナル抗体
準シソーラス用語： 発現ベクター , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： Clostridium difficile ,  toxin C proteins ,  polyclonal antibody

分類 (2件)： 抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (5件)： C蛋白質 ,  クローン ,  発現 ,  抗体 ,  調製