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J-GLOBAL ID:201802273073936871   整理番号:18A0473538

Geobacillus thermocatenulatusから好熱好アルカリ性リパーゼの生体触媒特性に及ぼす部位特異的ペプチドタグ標識の影響【Powered by NICT】

Effect of Site-Specific Peptide-Tag Labeling on the Biocatalytic Properties of Thermoalkalophilic Lipase from Geobacillus thermocatenulatus
著者 (4件):
資料名:
巻: 19  号:ページ: 369-378  発行年: 2018年 
JST資料番号: W1258A  ISSN: 1439-4227  CODEN: CBCHFX  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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テーラーメイドペプチドはGeobacillus thermocatenulatusリパーゼ(GTL)の部位特異的標識を調べた。GTLは最初の二変異体(GTLσ A193CとGTLσ S196C)を生産するために酵素の蓋部位上のユニークなシステインを導入することにより修飾した。化学修飾はシステイン含有ペプチドの小ライブラリーを用いて行った。合成ペプチドリパーゼ生体触媒が非常に安定し,より活性な,より特異的であり,非修飾GTLとは異なる基質に対してより選択的であった。ペプチドAc-Cys Phe Gly Phe Gly Phe CONH_2(1)とAc Cys Phe Phe CONH_2(2)(>60°Cで24時間後に95%活性)で修飾したGTLσ A193Cの非常に高い酵素熱安定性が観察された。GTLσ S196C中の1と2の取込は三の因子によるp-ニトロフェニル酪酸の加水分解におけるその触媒活性と五以上の改善であった。短鎖対長鎖エステルに対する特異性も強く改善された。GTLσ S196Cのジアシルグリセロール活性は1-ステアロイル-2-arachidonoyl-sn-グリセロールの加水分解における1の導入により10倍とAcCys-(Arg)7CONH_2(6)とこの変異体の修飾による3倍以上よりも増強された。GTLσ S196Cのエナンチオ選択性は,全ての形成されたバイオコンジュゲートの増加し,GTLσS196C1複合体は,最も活性な7(72%ee)でジメチルフェニルグルタル酸の加水分解に選択的であり,また,酵素エナンチオ選択性の反転を示した。Copyright 2018 Wiley Publishing Japan K.K. All Rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【Powered by NICT】
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分類 (2件):
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酵素一般  ,  酵素の応用関連 
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