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J-GLOBAL ID：201802274589367027   整理番号：18A0648461

B7-H6の過剰発現は,自然キラー細胞によって誘発される肝細胞アポトーシスにおける役割を果たす。【JST・京大機械翻訳】

Role of B7-H6 over-expression in NK cell-mediated apoptosis of hepato-cytes

著者 (6件)： Zou Yong (中山大学附属第三医院,輸血科,广東 广州510630) ,  Lin Zhesheng (中山大学附属第三医院,輸血科,广東 广州510630) ,  Chen Yuchan (中山大学附属第三医院,輸血科,广東 广州510630) ,  Liao Sihong (中山大学附属第三医院,輸血科,广東 广州510630) ,  Yuan Qing (中山大学附属第三医院,輸血科,广東 广州510630) ,  Lin Dongjun (中山大学附属第三医院,輸血科,广東 广州510630;中山大学附属第三医院,血液科,广東 广州510630)
資料名： Zhongguo Bingli Shengli Zazhi  (Zhongguo Bingli Shengli Zazhi)
巻： 33  号： 11  ページ： 2095-2098  発行年： 2017年 
JST資料番号： W1465A  ISSN： 1000-4718  CODEN： ZBSZEB  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的;B7同族体6(B7-H6)が自然キラー(NK)細胞によって媒介される肝細胞アポトーシスにおける作用を検討した。方法;B7-H6全長のオリゴヌクレオチドプライマーを設計し、PCR増幅によりB7-H6全長を調製し、そのサブクローンを線形化した真核発現ベクターpIRES2-EGFPにクローンし、組換えB7-H6過剰発現ベクターpIRES2-EGFP-B7-H6を構築した。二重酵素消化,PCR及び配列決定により同定した。リポフェクタミン2000を用いて,pIRES2-EGFP-B7-H6組換えプラスミドを正常肝細胞系L02にトランスフェクトし,蛍光顕微鏡によりEGFPの発現を観察し,フローサイトメトリーによりトランスフェクション効率を測定した。B7-H6 mRNAと蛋白質の発現は,RT-PCRとウエスタンブロットによって検出された。NK2-EGFP-B7-H6組換えプラスミドをトランスフェクトしたL02細胞とNK-92細胞を異なる効果的な標的比で共培養し、CCK-8実験を用いて、NK-92細胞のL02細胞に対する殺傷効果を分析した。結果;pIRES2-EGFP-B7-H6過剰発現ベクターを,PCR,酵素消化,および配列決定によって首尾よく構築した。リポフェクタミン2000により48時間処理した後に,蛍光顕微鏡下で強い緑色蛍光発現が観察され,フローサイトメトリーによりトランスフェクション効率が92.6%に達することが示された。qRT-PCRとウエスタンブロットの結果は,L02細胞におけるB7-H6のmRNAと蛋白質の発現が高いことを示した。CCK-8実験により、pIRES2-EGFPをトランスフェクションした細胞に対して、NK-92細胞のトランスフェクションにより、pIRES2-EGFP-B7-H6をトランスフェクションしたL02細胞に対する殺傷活性が著しく増強された(P<0.05)。結論;B7-H6の真核生物発現ベクターpIRES2-EGFP-B7-H6を成功裏に構築し、さらにNK-92細胞がB7-H6を過剰発現するL02細胞に対して顕著な殺傷効果があることを証明した。Data from Wanfang. Translated by JST【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： タンパク質 ,  共培養 ,  クローン ,  酵素的分解 ,  *アポトーシス ,  蛍光顕微鏡 ,  フローサイトメトリー ,  mRNA ,  ウェスタンブロット法 ,  PCR法 ,  トランスフェクション
準シソーラス用語： トランスフェクション効率 ,  EGFP ,  発現ベクター ,  *過剰発現 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： B7 homologue 6 ,  Eukaryotic expression vector ,  Natural killer cells ,  Hepatocytes ,  Apoptosis

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  ウイルス感染の生理と病原性  (EG04042Y)

タイトルに関連する用語 (5件)： 過剰発現 ,  キラー細胞 ,  誘発 ,  細胞アポトーシス ,  役割